[发明专利]一种HPV高危型荧光PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种HPV高危型荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括核酸释放剂和PCR反应液，所述核酸释放剂包含莎梵婷(surfactin)0.01～0.5mmol/L，氯化钾20～300mmol/L，十二烷基磺酸钠0.01～2％和乙醇0.05～1％；所述PCR反应液中包含高危HPV16型、18型和内标的引物探针序列；

其中，用于16型、18型和内标扩增和检测的引物探针序列分别为，

16型上游引物：AGATGTCTCTTTGGCTGCCTAGT，

16型下游引物：CATCCGTGCTTACAACCTTAGAT，

16型探针：CCACTGTCTACTTGCCTCCTGTCCCA；

18型上游引物：ATGCCGCCACGTCTAATGT，

18型下游引物：TGATAAAGGACGCGATTTACAAG，

18型探针：CCTTTAGCCCAGTGTTCCCCAATAGC；

内标上游引物：CTGCCGTTACTGCCCTGTG，

内标下游引物：TTGGTCTCCTTAAACCTGTCTTG，

内标探针：ACCACCAACTTCATCCACGTTCACC。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液中还包含高危HPV31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型和68型这13种高危HPV中一种或多种型的引物探针序列；

其中，用于这13种高危HPV型扩增和检测的引物探针序列分别为，

31型上游引物：CAAAGACCGTTGTGTCCAGAAG，

31型下游引物：CGCATGTTTACACTTGGGTTTC，

31型探针：CAACGTCCTGTCCACCTTCCTCCTATG；

33型上游引物：AATATACAGGAAGGGGAGGATGAT，

33型下游引物：GTTTGCAGCACGATCAACAAC，

33型探针：TCCTCCGCAGCACTTTGTGAACATG；

35型上游引物：GGACGAAAATGAAGATGACTGTG，

35型下游引物：TGTGTGTTTGCTCCTCCTGTG，

35型探针：AATGCTTGTGCTGTCTCTGTTTCTGCCT；

39型上游引物：TGCCCGATCCTAATAAATTCAGT，

39型下游引物：ATGGGTGTCCACTAATACCAACAC，

39型探针：CTGCCCACCTCCACCCCTACACA；

45型上游引物：GGATACAAAGACTAACTATTATACAACATGG，

45型下游引物：AAATGCCATATCACTTTCATCTGT，

45型探针：CATTATCAAATGCCCATTGTACCATTTCTGA；

51型上游引物：ATGGCATTTGCTGGAACAATCA，

51型下游引物：GCTTAAAGTTACTTGGAGTAAATGTTGG，

51型探针：GGAAACCGCAGCAGTGGCAGTG；

52型上游引物：GGAGGACCCTGAAGGTACAGAG，

52型下游引物：TTTGTTTTTCTATTATTGCCTCTACTTC，

52型探针：CCAGCCTGTACATCCCTCCCTTTCG；

53型上游引物：GTGCTCGTGTGCATTATTATTATGAT，

53型下游引物：GCATAAATATCATATAGGCCATCAAAT，

53型探针：AGACAATAATGGCTGCATTTCAATTTC；

56型上游引物：CCAGAGAGTCCCACGCAAAG，

56型下游引物：GCAGGGTGGTTGTTGTTGTTG，

56型探针：CACACATCAGCGACACAGACAATACCGA；

58型上游引物：GAGGATGGTGACATGGTAGATACAG，

58型下游引物：ACTGTTACAAATATCAATAGGCACATC，

58型探针：TAGCCTGCAATGTACCAAAGTCCATGC；

59型上游引物：CTTTGTGTGTCCGTGGTGTGC，

59型下游引物：CTGTATCTGTTGCATTTTCATCCTC，

59型探针：CGTCCCCTCCCCGTCTGTACCTTC；

66型上游引物：ACCAGAATGGATACAAAGACAAACAC，

66型下游引物：CTATTTGGCTATCATCTGTTACTTCATT，

66型探针：TCAAATGCCCACTGCACCATTTTAGA；

68型上游引物：TGCAGGACATTGGACACTACATT，

68型下游引物：TTTAAGTCACCAAAGGCAAATTC，

68型探针：TACCTCTGTCCGTTGTAGTTGCCTTCTG。