[发明专利]一种组织培养法生产富硒大米蛋白的方法

权利要求书

1. 一种组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）清洗：将新鲜糙米或稻米胚用自来水冲洗；

（2）消毒：将经步骤（1）清洗的新鲜糙米或稻米胚用消毒液浸泡消毒5min-30min，然后再用无菌水清洗，共循环消毒-清洗1-5次；

（3）胚组织培养：

将经过步骤（2）消毒的新鲜糙米或稻米胚置于经过灭菌的发酵容器中，添加无菌浸泡液，在摇床转速80-110r/min、温度20-35℃下，发酵12-96h；　

或者将经过步骤（2）消毒的新鲜糙米或稻米胚置于经过灭菌的发酵容器中，添加无菌浸泡液，在15－35℃下浸泡4－24h，再置于发酵浅盘中，在 20－35℃下培养12－48h；

所述无菌浸泡液中含无机硒及植物生长调节剂；

（4）收集培养物：采用离心或过滤的方法收集经步骤（3）培养的新鲜糙米或稻米胚，再水洗，打浆；

（5）提取蛋白：先用0.1-2N的NaOH溶液调pH值至9-13，搅拌，过滤，取滤液，加0.1-2N的HCl溶液调pH值至5-7，过滤，收集滤渣，即得。

2.根据权利要求1所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述新鲜糙米或稻米胚为当年采收之稻谷加工的糙米或稻米胚。

3.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述消毒液为次氯酸钙溶液、次氯酸钠溶液、二氧化氯溶液、氯溶液、双氧水、臭氧溶液、酸性氧化电位水、过氧乙酸溶液、乙醇溶液或草酸溶液。

4.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述摇床培养的时间为48-72h。

5.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述发酵浅盘中培养的时间为 24－30h。

6.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述无菌浸泡液无机硒中的硒元素的浓度为5mg/L-80mg/L。

7.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述无机硒源亚硒酸钠和/或亚硒酸。

8.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述植物生长调节剂包括2,4-二氯苯氧乙酸、激动素、α-萘乙酸、6-苄氨基嘌呤，所述无菌浸泡液中植物生长调节剂的浓度分别为：2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0.5-6.5 mg/L、激动素的浓度为0-2.0 mg/L、α-萘乙酸的浓度为0-1.0 mg/L 、6-苄氨基嘌呤的浓度为0-2.0 mg/L。

9.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述NaOH溶液的浓度为0.5-1N。

10.根据权利要求1或2所述的组织培养法生产富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述HCl溶液的浓度为0.5-1N。