[发明专利]一种人血小板同种抗原系统基因分型的PCR‑SBT方法及试剂有效
| 申请号： | 201410291315.6 | 申请日： | 2014-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN105296601B | 公开（公告）日： | 2017-12-19 |
| 发明（设计）人： | 朱发明;何吉;陈舒;洪小珍;许先国;刘瑛;吕杭军 | 申请（专利权）人： | 浙江省血液中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司33100 | 代理人： | 刘晓春 |
| 地址： | 310006 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血小板 同种 抗原 系统 基因 pcr sbt 方法 试剂 | ||
1.一种人血小板同种抗原系统基因分型的PCR-SBT方法所用的试剂，其特征在于：所述抗原系统为HPA1-28w抗原系统，由28个抗原基因组成：HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、HPA-5、HPA-6w、HPA-7w、HPA-8w、HPA-9w、HPA-10w、HPA-11w、HPA-12w、HPA-13w、HPA-14w、HPA-15、HPA-16w、HPA-17w、HPA-18w、HPA-19w、HPA-20w、HPA-21w、HPA-22bw、HPA-23bw、HPA-24bw、HPA-25bw、HPA-26bw、HPA-27bw、HPA-28bw，所述试剂由用于扩增28个HPA抗原基因的18个扩增引物和用于测序分析的6个寡核苷酸测序引物组成；
所述用于扩增的引物为：
(1)HPA-1和HPA-10w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-1,10F:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTCTTggCCTCCCAAAgTATCA3’
HPA-1,10R:5’TCCAAACTCATCAATgTATCCACCTgCTTCAggTCTCTCC3’
(2)HPA-2抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-2F:5’TgTAAAACgACggCCAgTTATCCCACAATCAgCTgCAA3’
HPA-2R:5’CAggAAACAgCTATgACCgAgATTCTCCAgCCCATTCA3’
(3)HPA-3、HPA-9w和HPA-27bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-3,9,27F:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTggAAgAAAgACCTgggAAgg3’
HPA-3,9,27R:5’TCCAAACTCATCAATgTATCTCTTTCAgCTCACCCCAgAC3’
(4)HPA-4、HPA-16w和HPA-19w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-4,16,19F:5’ACgTgggTATAAgAggCgTCAATCTTggTgggAgAAgAA3’
HPA-4,16,19R:5’CgATgCTAgACgATCCAggCCTTAggCTCCATTgACAC3’
(5)HPA-5抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-5F:5’ACgTgggTATAAgAggCgTgAgggAAggAACTgTgCTC3’
HPA-5R:5’CgATgCTAgACgATCCAgACAAgAAAgCATTgCCCTgT3’
(6)HPA-6w和HPA-7w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-6,7F:5’ACgTgggTATAAgAggCgTgCTTgTgTTTTTgCTTTgC3’
HPA-6,7R:5’CgATgCTAgACgATCCAgggCCTTCACCTATgTTTCCA3’
(7)HPA-8w、HPA-11w、HPA-21w和HPA-23bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-8,11,21,23F:5’TGTAAAACGACGGCCAGTTAATggAg(a/g)TggAgCAgCTT3’
HPA-8,11,21,23R:5’CAGGAAACAGCTATGACCTAgAACCTgggTgTgTgCAA3’
(8)HPA-12w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA12F:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTCTCCCgCTgCAgAgTAAgC3’
HPA12R:5’TCCAAACTCATCAATgTATCgTTgTgTCgACAgggAAgg3’
(9)HPA-13w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-13F:5’ACgTgggTATAAgAggCgCAATAgCAACAAAgAACAATCCA3’
HPA-13R:5’CgATgCTAgACgATCCAgAgTCggAAgCCACAAAgTTC3’
(10)HPA-14w，26bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-14,26F-1:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTATCTgTgTggTTgggAgAgC3’
HPA-14,26R-1:5’TCCAAACTCATCAATgTATCggCTCTggTgAgCAAgAAAC3’
(11)HPA-15抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-15F:5’TGTAAAACGACGGCCAGTCCTATTCTTTgAAAAgTTgggATT3’
HPA-15R:5’CAGGAAACAGCTATGACCAAAC(C/A)AgTAgCCACCCAAgA3’
(12)HPA-17w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-17F:5’TGTAAAACGACGGCCAGTgCCTTTTCCATgAAggTgTC3’
HPA-17R:5’CAGGAAACAGCTATGACCCCAgAAATCCCCAgAgTTCA3’
(13)HPA-18w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-18F:5’TGTAAAACGACGGCCAGTTCCAAgAAgACACAATAAAgCAA3’
HPA-18R:5’CAGGAAACAGCTATGACCTTggAAgggTgAgCATTTTC3’
(14)HPA-20w抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-20F:5’ACgTgggTATAAgAggCggAgCCCCgATACCATCTACA3’
HPA-20R:5’CgATgCTAgACgATCCAgAgggAgggAgATgAgAgAgC3’
(15)HPA-22bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-22F:5’ACgTgggTATAAgAggCgAgCCCTTgCTTTggATCTg3’
HPA-22R:5’CgATgCTAgACgATCCAgggTTgCTggAgTCAAAggAg3’
(16)HPA-24bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-24F:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTgACCTgATCgTgggAgCTTA3’
HPA-24R:5’TCCAAACTCATCAATgTATCCAgTggCTCCAACACACATC3’
(17)HPA-25bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-25F:5’TgTAAAACgACggCCAgTATgCCAgCTTCTCTgCATTT3’
HPA-25R:5’CAggAAACAgCTATgACCCCTCgCCAAAATCTCAACAT3’
(18)HPA-28bw抗原系统的基因序列的扩增引物，
HPA-28F:5’TCTAAAAgCTgCggAATTgTCAgTgTggCATgCTCTTTgT3’
HPA-28R:5’TCCAAACTCATCAATgTATCTgTTCTgCTCCCTCTCACCT3’，
所述6条寡核苷酸测序引物序列如下：
M13F:5’-TGTAAAACGACGGCCAGT-3’
M13R:5’-CAGGAAACAGCTATGACC-3’
PCMVF-BD:5’-TCTAAAAgCTgCggAATTgT-3’
PCMVR:5’-TCCAAACTCATCAATgTATC-3’
pDC316F:5’-ACgTgggTATAAgAggCg-3’
pDC316R:5’-CgATgCTAgACgATCCAg-3’。
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