[发明专利]一种用于检测盐酸戊乙奎醚中副产物的方法

说明书

技术领域

本发明是一种用于检测盐酸戊乙奎醚中副产物的方法，具体涉及盐酸戊乙奎醚原料药中副产物的定量检测方法，属于药物检测领域。 

背景技术

盐酸戊乙奎醚是我国研制的具有自主知识产权的新药，其原料药的现有剂型主要为注射液，即盐酸戊乙奎醚注射液（长托宁），具有选择性胆碱受体拮抗作用，不仅能有效避免阿托品产生的心动过速等不良反应，还具有药效长、不良反应少等优势，其适应症包括：用于麻醉前给药以抑制唾液腺和气道腺体分泌、用于有机磷毒物（农药）中毒急救治疗和中毒后期或胆碱酯酶（ChE）老化后维持阿托品化等。目前，该药已在麻醉前用药、有机磷农药中毒抢救、休克、呼吸系统疾病、心血管疾病及戒毒治疗等临床领域中开始应用，如：专利文献CN02134118.4披露的一种药物化合物及其组合物和在制药中的应用、专利文献CN200510088052.X披露的盐酸戊乙奎醚在制药中的应用以及专利文献CN200910058142.2披露的盐酸戊乙奎醚在制备治疗失血性休克疾病药物中的应用等。 

现有情况是，随着我国对药品研发中杂质研究要求的日益严格和明确，尤其是对药品副产物、降解产物等的研究已进入了一个全新阶段的今天，药品在临床使用中是否会产生不良反应日益重要。当然，我们还清楚的知道，在实际临床领域中，药品在临床使用过程中产生的不良反应，除了与药品主成分的药理活性有关外，还与药品中存在的杂质有关系，在临床实验中，往往通过药品副产物的方式存在，因此，为不断提高盐酸戊乙奎醚注射液的安全性和有效性，本发明建立了一种能准确定量检测盐酸戊乙奎醚（如：盐酸戊乙奎醚原药液）中的副产物的方法。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测盐酸戊乙奎醚中副产物的方法，本检测方法是采用高效液相色谱法，用3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐作为对照品进行定位，对盐酸戊乙奎醚中3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐进行的定量检测，其专属性、定量限与检测限、线性、精密度、准确度、溶液稳定性、耐用性等方面均经详细认证，且各项验证结果均符合相关法规和指导原则的要求，实际检测效果良好。 

本发明通过下述技术方案实现：一种用于检测盐酸戊乙奎醚中副产物的方法，所述的检测方法包括使用高效液相色谱法检测盐酸戊乙奎醚中副产物的含量，所述的副产物为3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐，包含以下步骤： 

A：制备供试品溶液：取盐酸戊乙奎醚和流动相混合配制成供试品溶液，待用，按质量比，盐酸戊乙奎醚：流动相的比值为（1～3）：1000；

B：制备对照品溶液：提供3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐对照品，将3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐对照品与流动相混合配制成对照品溶液，待用，按质量比计，3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐对照品：流动相的比值为（0.005～0.02）：1000；

C：测定：分别吸取等量的对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，所述高效液相色谱法的测定条件包括：

色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填充剂；

流动相：主要由甲醇-水相或乙腈-水相组成；

流速：0.5～1.5ml/min；

柱温：20～40℃；

检测波长：205～216nm。

本方法检测限达0.62μg/ml，即可以检出盐酸戊乙奎醚中高于0.03%的3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐，实用性强。 

为更好地实现上述步骤，进一步的在所述的步骤A中，盐酸戊乙奎醚与流动相的质量比为2：1000；在所述的步骤B中，3-[2-环戊基2-苯基-2-（2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基）乙氧基]奎宁环烷盐酸盐对照品与流动相的质量比为  0.01：1000。 

在本发明中，所述的流动相为：体积比为80：20：0.5的甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液-三乙胺。 

进一步的，所述的流动相用磷酸溶液调节pH值为4.0～6.0。