[发明专利]一种用于血液中全基因组DNA提取试剂盒及其方法

权利要求书

1.一种用于从血液中提取高纯度全基因组DNA的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括红细胞裂解液、白细胞洗涤液、消化液、蛋白酶K、纯化液、gDNA盐析液、gDNA洗涤液及gDNA洗脱液；采用所述试剂盒提取血液中全基因组DNA时，不用事先对血液中进行血浆和血清分离，只需取新鲜或冰冻的抗凝全血。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，各组成分别为：

1)红细胞裂解液：灭菌的去离子超纯水，400ml/瓶；

2)白细胞洗涤液：体积比为0.1％的聚乙二醇辛基苯基醚(Triton-X100)，300ml/瓶；

3)消化液：含1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris-HCl)，0.5mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)，0.2mol/L NaCl，质量体积比为10g/ml的十二烷基硫酸(SDS)，40ml/支；

4)蛋白酶K：为20mg/ml的蛋白酶K，1ml/支；

5)纯化液：为5-7.5mol/L的氯化锂(LiCl)，40ml/瓶；

6)gDNA盐析液：无水乙醇，500ml/瓶；

7)gDNA洗涤液：体积比为80％的乙醇，40ml/瓶；

8)gDNA洗脱液：含1mol/L Tris-HCl，0.5mol/L EDTA，10ml/支。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述gDNA提取试剂盒组份可用于1ml血量的50次血液中全基因组DNA提取，并可组成100次、200次和500次gDNA提取试剂盒，含使用说明书一份，试剂盒保存在4℃冰箱。

4.根据权利要求1-3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述纯化液优选地为7.5mol/L的氯化锂(LiCl)。

5.根据权利要求1-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，将提取得到的所述gDNA采用琼脂糖凝胶电泳检测，该琼脂糖凝胶电泳检测为单一条带，无拖尾和杂带。

6.根据权利要求1-5任一项所述的试剂盒，其特征在于，将提取得到的所述gDNA采用超微量分光光度计检测，检测结果为A260/A280比值大于1.8，无蛋白和酚类物质污染；A260/A230的比值大于2.0，无碳水化合物、盐类或有机溶剂污染。

7.根据权利要求1-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，将提取得到的所述gDNA采用超微量分光光度计检测，超微量分光光度计检测1ml血量提取的gDNA效率达到20μg/ml以上；满足所有基因研究和检测的样品要求。

8.根据权利要求2-7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述灭菌的去离子超纯水的电阻率大于18MΩ*cm；所述Tris-HCl、EDTA的pH值均为8.0。