[发明专利]棉花杂交种亲子鉴定方法

说明书

本发明提供一种棉花杂交种亲子鉴定方法，该方法使用分布于棉花基因组26条染色体的36对SSR核心引物(Seq ID No.1‑72)，通过对两个亲本与待测杂交种进行DNA指纹检测，采用亲权排除位点与双亲杂合位点统计分析后鉴定假设杂交种与亲本的亲子关系。本发明方法操作简单，准确稳定，适用于棉花杂交种亲子关系快速鉴定。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体地说，涉及一种棉花杂交种亲子鉴定方法。

背景技术

棉花是我国主要的经济作物，优良新品种的培育与推广对国民经济的发展与人民生活水平的提高具有重要意义。近年来，随着棉花杂交育种工作的迅速开展，加上杂交种所表现出的杂种优势，棉花杂交种在我国得到了广泛的推广与种植。棉花杂交种具有高产、优质、抗逆性强等优良特征特性，一般较常规品种增产15％左右。然而，棉花杂交种生产为劳动密集型产业，制种成本相对较高，杂交种子棉收购价格一般是普通常规棉种的4-5倍，受利益的驱动，即使在管理严格的情况下，以常规种(或亲本)冒充杂交种、或其他杂交种冒充畅销杂交种等掺杂使假的现象仍时有发生。依据形态性状进行杂交种田间鉴定的传统手段时效性差，且容易受到环境与主观因素的影响，杂交种市场混乱的局面难以得到有效控制。

近年来，分子生物学的发展使品种鉴定进入到基因水平，与传统的形态学方法和蛋白质电泳技术相比，DNA标记技术能揭示更多的多态性，具有准确可靠、简单快速、易于自动化的优点，是品种鉴定技术的发展趋势。与其它分子标记相比，以微卫星序列为基础的简单重复序列(SSR)标记在DNA指纹鉴定上显示了独特的优越性：SSR标记数量丰富，覆盖整个基因组，揭示的多态性高，以孟德尔方式遗传，呈共显性，SSR标记已成为品种鉴定首选技术之一。

由于SSR标记是共显性标记，因此，如果杂交种与亲本间存在亲子关系，则杂交种的谱带必须由两个亲本提供。如果假设杂交种的某位点表现的谱带在对应的两个假设亲本上均没有出现，这种不符合孟德尔遗传分离规律的位点即为亲权排除位点，亲权排除位点数越多，表明亲本与杂交种存在亲子关系的可能性越低。反之，如果假设杂交种的某位点表现的带型为两个假设亲本上谱带的杂合互补带型，且两个假设亲本在该位点表现为不一样的带型，这种符合孟德尔遗传分离规律的位点即为双亲杂合位点。

发明内容

本发明的目的是提供一种棉花杂交种亲子鉴定方法。

为了实现本发明目的，本发明首先提供用于鉴定棉花杂交种的SSR-PCR引物组合，

本发明的目的是采用以下的技术方案来实现的。依据本发明提供的，所述引物组合由下列引物对中的两种或两种以上组成：