[发明专利]一种用于苗木种植的复合微生物肥的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物培育用的复合微生态制剂，尤其涉及一种用于苗木种植的复合微生态制剂。

背景技术

随着我国生态建设的发展，绿化造林在我国生态建设中显得愈来愈重要，人们对绿化的质量和要求也越来越高。而苗木的种植培育是绿化的首要环节，在苗木的种植培育过程中，苗木的生长需要的大量养分尤其是多种化学元素，现有主要是通过光合作用制造的碳水化合物、及土壤中的养分来供应其生长的需要，但是在很多时候，光合作用及土壤中的养分含量并无法满足苗木生长的需求，从而导致苗木生长较为缓慢，且存活率也相对较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于苗木种植的复合微生物肥的制备方法，利用其不仅能够促进苗木的生长，而且可以提高苗木种植培育的成活率。

 本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种用于苗木种植的复合微生态制剂，其制备方法的具体步骤如下：

 （1）原菌种斜面培养：将冷冻保藏管中的光合菌、固氮菌、硅酸盐细菌、蓝藻、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后分别置于 90mm 培养皿中进行纯化，得光合菌斜面菌种、固氮菌斜面菌种、硅酸盐细菌斜面菌种、蓝藻斜面菌种、及酿酒酵母斜面菌种，备用；

 （2）原菌种液体培养：将光合菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中，之后置于 28℃ -30℃厌氧钨丝灯光照培养 5-7 天得光合菌原菌液；将固氮菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中，接着于25℃-27℃下好氧培养1-2天得固氮菌原菌液；将硅酸盐细菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中，接着于 28℃ -30℃下好氧培养 1-2 天得硅酸盐细菌原菌液；将蓝藻斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中，接着置于 28℃ -30℃荧光灯每天照射10-14小时且好氧培养3-5天，得蓝藻原菌液；将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅴ中，之后于28℃-30℃下好氧培养 3 天得酿酒酵母原菌液；

 （3）一级种子培养：将光合菌原菌液、固氮菌原菌液、硅酸盐细菌原菌液、蓝藻原菌液、及酿酒酵母原菌液按 2：2：2：2：1 的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，具体地：先接种固氮菌原菌液、硅酸盐细菌原菌液、蓝藻原菌液、及酿酒酵母原菌液，并于28℃ -30℃好氧培养 3 天，然后再接种光合菌原菌液，于 37℃厌氧培养 3 天，得复合微生态制剂的一级种子；

 （4）二级种子培养：将所得的一级种子按 5% 的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中，并于28℃-30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天，得复合微生态制剂的二级种子；

 （5）成品培养：将所得的二级种子按 5% 的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中，并于 28℃ -30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养 3-5 天，获得复合微生态制剂的成品。

 进一步地，所述步骤（1）中光合菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将光合菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上，之后于28℃-30℃厌氧钨丝灯光照培养5-7天；所述斜

面培养基Ⅰ的灭菌温度为 121℃、灭菌时间为 15min；且该斜面培养基Ⅰ的组分：酵母粉 10克、磷酸氢二钾 1 克、硫酸镁0.5克、琼脂 20 克、水 1000ml、PH7.0-7.2。

 进一步地，所述步骤（1）中固氮菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将固氮菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅱ上，之后于25℃-27℃下好氧培养1-2天；所述斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min；且该斜面培养基Ⅰ的组分：酵母粉0.5克、甘露醇20克、磷酸二氢钾0.2克、磷酸氢二钾0.8克、硫酸镁0.2克、硫酸钙0.1克、琼脂15克、氯化铁 0.01 克、钼酸钠 0.01克、琼脂15 克、水 1000ml、PH7.2。

 进一步地，所述步骤（1）中硅酸盐细菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将硅酸盐细菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅲ上，之后于 25℃ -28℃下好氧培养 1-2 天；所述斜面培养基Ⅲ的灭菌温度为 121℃、灭菌时间为 20min ；且该斜面培养基Ⅲ的组分：蔗糖 10克、硫酸钙5克、磷酸氢二钾0.2克、碳酸钙5克、硫酸镁0.2克、氯化钠0.2克、琼脂14克、水 1000ml、PH7.5。