[发明专利]一种用于苗木种植的复合微生物肥的制备方法

权利要求书

1.一种用于苗木种植的复合微生物肥的制备方法，其特征在于：其制备方法的具体步骤如下：

  （1）原菌种斜面培养：将冷冻保藏管中的光合菌、固氮菌、硅酸盐细菌、蓝藻、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后分别置于 90mm 培养皿中进行纯化，得光合菌斜面菌种、固氮菌斜面菌种、硅酸盐细菌斜面菌种、蓝藻斜面菌种、及酿酒酵母斜面菌种，备用；

  （2）原菌种液体培养：将光合菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中，之后置于28℃ -30℃厌氧钨丝灯光照培养 5-7 天得光合菌原菌液；将固氮菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中，接着于25℃-27℃下好氧培养1-2天得固氮菌原菌液；将硅酸盐细菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中，接着于 28℃ -30℃下好氧培养 1-2 天得硅酸盐细菌原菌液；将蓝藻斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中，接着置于 28℃ -30℃荧光灯每天照射10-14小时且好氧培养3-5天，得蓝藻原菌液；将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅴ中，之后于 28℃ -30℃下好氧培养 3 天得酿酒酵母原菌液，所述步骤（2）中液体培养基Ⅰ的组分：酵母粉 10 克、磷酸氢二钾 1 克、硫酸镁 0.5 克、水 1000ml、PH7.0-7.2；液体培养基Ⅱ的组分：酵母粉0.5克、甘露醇20克、磷酸二氢钾0.2克磷酸氢二钾0.8克、硫酸镁0.2克、硫酸钙0.1克、氯化铁0.01克、钼酸钠0.01克、水1000ml、PH7.2；液体培养基Ⅲ的组分：蔗糖10克、硫酸钙5克、磷酸氢二钾0.2克、碳酸钙5克、硫酸镁0.2克、氯化钠0.2克、水1000ml、PH7.5；液体培养基Ⅳ的组分：硝酸钠1.5克、磷酸氢二钾0.05克、硫酸镁0.08克、氯化钙0.04克、碳酸钠0.02克、柠檬酸0.006克、柠檬酸铁0.006克、硫酸锌0.001克、氯化锰0.001克、水1000ml、PH自然；液体培养基Ⅴ的组分：马铃薯200克、蔗糖 20克、水 1000ml、PH 自然；

  （3）一级种子培养：将光合菌原菌、固氮菌原菌液、硅酸盐细菌原菌液、蓝藻原菌液、及酿酒酵母原菌液按 2：2：2：2：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，具体地：先接种固氮菌原菌液、硅酸盐细菌原菌液、蓝藻原菌液、及酿酒酵母原菌液，并于28℃ -30℃好氧培养 3 天，然后再接种光合菌原菌液，于 37℃厌氧培养 3 天，得复合微生态制剂的一级种子 ，所述步骤（3）中发酵培养基Ⅰ的组分：桔水5%、酵母粉0.5%、蛋白胨1%、氯化铵0.2%、氯化钠0.1%、磷酸二氢钾 0.1%、硫酸镁 0.05%、硫酸锌 0.025%、硫酸亚铁 0.025%，余量为水；

  （4）二级种子培养 ：将所得的一级种子按 5% 的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ

中，并于 28℃ -30℃下先好氧培养 3-5 天再厌氧培养 3-5 天，得复合微生态制剂的二级种子 ，所述步骤（4）中发酵培养基Ⅱ的组分：桔水 5%、酵母粉 0.1%、蛋白胨 0.1%、氯化铵 0.2%、氯化钠0.1%、磷酸二氢钾 0.1%、硫酸镁 0.05%、硫酸锌 0.025%、硫酸亚铁 0.025%，余量为水；

  （5）成品培养：将所得的二级种子按 5% 的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中，并于 28℃ -30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养 3-5 天，获得复合微生态制剂的成品,所述步骤（5）中发酵培养基Ⅲ的组分：桔水 5%、氯化铵 0.2%、氯化钠 0.1%、磷酸二氢钾 0.1%、硫酸镁0.05%、硫酸锌 0.025%、硫酸亚铁 0.025%，余量为水。

2.根据权利要求 1 所述的一种用于苗木种植的复合微生物肥的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中光合菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将光合菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上，之后于 28℃ -30℃厌氧钨丝灯光照培养 5-7 天；所述斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为 15min ；且该斜面培养基Ⅰ的组分：酵母粉 10 克、磷酸氢二钾 1 克、硫酸镁 0.5 克、琼脂20 克、水 1000ml、PH7.0-7.2。