[发明专利]一种制备醋酸加尼瑞克的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽类药物的制备方法，是一种合成的十肽GnRH（内源性促性腺素释放素）模拟肽醋酸加尼瑞克的制备方法。 

背景技术

醋酸加尼瑞克，英名为：Ganirelix，结构式如下： 

肽序列为：

图-1 Ganirelix的氨基酸序列

加尼瑞克（Ganirelix, AntagonTM）是由Merck开发的一支合成的十肽GnRH（内源性促性腺素释放素）模拟肽，对天然GnRH的第1、2、3、6、8和10位氨基酸进行了置换，对天然GnRH具有较高的拮抗作用。

研究表明，本品能够竞争性结合脑下垂体促性腺激素细胞上的GnRH受体，迅速、可逆的抑制促性腺激素的释放。对脑下垂体LH（黄体生成激素）分泌的抑制作用强于FSH（卵泡刺激素）的控制。停药后，LH和FSH的分泌可在48小时内恢复正常。于1999年7月29日被美国FDA批准用于接受控制性超排卵辅助生殖治疗的妇女，防治LH（黄体生成激素）峰过早。 

US4801577， US5212288和US5767082公开了一种Boc策略的醋酸加尼瑞克的固相合成法，然而该工艺落后，废液多，成本昂贵，收率低，环境污染大，不利于大规模生产。 

CN102584945A公开了一种Fomc策略一种醋酸加尼瑞克的制备方法，通过Fmoc固相合成法，制备得到醋酸加尼瑞克，但是由于Fomc-homoArg(Et)₂-OH和Fomc-D-homoArg(Et)₂-OH制备需单独制备，合成精制比较复杂，异构体不容易控制，合成周期长，成本高，收率低，杂质多，不适用于工业化生产。 

为此，本发明人对醋酸加尼瑞克的合成方法进行了研究，从而得到了本发明的技术方案。 

发明内容

本发明的目的是提供一种醋酸加尼瑞克的固相合成方法。本发明需要解决的技术问题是：Fomc-homoArg(Et)₂-OH和Fomc-D-homoArg(Et)₂-OH制备需单独制备，合成精制比较复杂，异构体不容易控制，合成周期长，成本高，收率低，杂质多，不适用于工业化生产。 

本发明的合成路线如图1所示：以氨基树脂为起始树脂，通过Fmoc固相合成法，按照醋酸加尼瑞克肽序依次偶联具有侧链保护的氨基酸，其中肽序6,8位氨基酸偶联分别采用Fmoc-D-Lys(Dde)-OH和Fmoc-Lys(Dde)-OH，偶联完成后，脱除Fmoc保护基，然后N端进行乙酰化反应，采用体积比为3:97的水合肼和DMF组成的混合溶液脱除Dde保护基，然后在树脂中加入N,N'-二乙基碳二亚胺和三氟甲磺酸镱进行侧链修饰反应，形成Et保护的胍基，最后裂解、纯化，冻干得到醋酸加尼瑞克。 

本发明中一些常用的缩写具有以下含义； 

Fmoc ：芴甲氧羰基

Fmoc-AA ：芴甲氧羰基保护的氨基酸

DIC ：N，N′-二异丙基碳化二亚胺

DCC ：N，N′-二环己基碳二亚胺

PyBOP : 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷

HATU : 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

HOBt ：1- 羟基苯骈三唑

HOSu ： N-羟基琥珀酰亚胺

tBu ：叔丁基

Trt ：三苯甲基

Boc : 叔丁氧羰基

Pbf ： 2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基

Dde ：N-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧环亚己基-1)乙基

HomoArg：高精氨酸

Tyr ：酪氨酸

Pro ：脯氨酸

Leu ：亮氨酸

Lys ： 赖氨酸

Ser ：丝氨酸

D-2-Nal-OH：D-2-萘丙氨酸

4-Chloro-D-Phe-OH：D-4-氯苯丙氨酸

3-(3-pyridyl)-D-alanine：D-3-(3-吡啶基)-丙氨酸

DMF ：N，N′-二甲基甲酰胺

Ac₂O：醋酸酐

Py：吡啶

MeOH ：甲醇

DCM：二氯甲烷

NMP : N-甲基吡咯烷酮

DMSO ：二甲基亚砜

TFA ：三氟醋酸