[发明专利]一种微生态饲料添加剂及其制备方法

权利要求书

1.一种微生态饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂由酵母代谢物及胞内物、乳酸菌代谢物按一定比例混合得到。

2.根据权利要求1所述的微生态饲料添加剂，其特征在于，所述的酵母代谢物及胞内物与乳酸菌代谢物的质量比为1：1、1:2或2:1。

3.根据权利要求1或2所述的微生态饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂采用喷雾干燥技术对上述液体代谢产物进行干燥处理得到。

4.一种微生态饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、酵母代谢物及胞内物的制备:(1)将保存的酿酒酵母菌种接种到YPD斜面培养基中，28～30℃静止培养48小时得到复活的菌种；(2)将复活的酵母接种至液体YPD培养基中培养得一级种子液；(3)将一级种子液以4～10％的量接种至筛选的有氧发酵培养基，28～30℃有氧发酵24～48h得二级种子液；(4)液体厌氧发酵：将二级种子液以10～20％的接种量接种至液体厌氧发酵培养基中，15～20℃厌氧发酵24～48h得厌氧发酵产物；(5)细胞自溶：木瓜蛋白酶按菌体干重1-2％的量加入厌氧发酵液中50～55℃自溶36～48小时，得酵母细胞自溶物；(6)液体代谢复合物经喷雾干燥处理；

步骤二、乳酸菌代谢物的制备(1)将保存的植物乳杆菌接种到MRS斜面培养基中，37℃静止培养48小时，得到复活的菌种；(2)将复活的植物乳杆菌接种至优化后的液体MRS培养基中得一级种子液；(3)将一级种子液以2～4％的量接种至液体厌氧培养基中35～37℃厌氧发酵24～36h，得厌氧发酵产物(4)厌氧发酵代谢经喷雾干燥处理；

步骤三、复合代谢物的制备:将喷雾干燥的酵母代谢产物和植物乳杆菌代谢产物按不同质量配比进行复配，得到不同质量配比的微生态饲料添加剂。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤一中厌氧发酵培养基的质量配比为：12～20％糖蜜、0.05～0.15％氯化钠、0.05～0.15％氯化钙、0.05～0.15％硫酸镁、0.05～0.2％蛋白胨、0.05～0.1％氯化钾、0.05～0.1％磷酸氢二钾、0.05～0.1％硫酸铵,余量为水，并调节pH为6.5～7.5。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤三中复合微生态饲料添加剂的制备：首先采用单一菌种工业发酵技术生产特定抗应激性代谢物组，将两个单菌种发酵代谢物组按质量进行1：1、1:2、2:1的复配得不同组合的复合微生物代谢物组。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤一中液体厌氧发酵过程中采用不适于酵母菌生长的应激条件，但要同时确保酵母菌的活性，使其在应激条件下产生特定的抗应激代谢产物，培养基的pH控制在6.5～7.5，温度控制在15～20℃，接种量控制在10-20％，培养时间控制在24-48h。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

步骤一、酵母代谢物制备:(1)将保存的酿酒酵母菌种接种到YPD斜面培养基中，28～30℃静止培养48小时得到复活的菌种；(2)将复活的酵母接种至液体YPD培养基中培养得一级种子液；(3)将一级种子液以4％的量接种至筛选的有氧发酵培养基30℃有氧发酵24h得二级种子液；(4)液体厌氧发酵：将二级种子液以20％的接种量接种至液体厌氧发酵培养基中，该厌氧发酵液体培养基的质量配比为：糖蜜20％、0.05％、氯化钠、0.05％氯化钙、0.05％硫酸镁、0.2％蛋白胨、0.05％氯化钾、0.1％磷酸氢二钾、0.1％硫酸铵,余量为水，并调节厌氧发酵过程中培养基的pH控制在7.5，温度控制在15℃，接种量控制在20％，培养时间控制在24h；(5)细胞自溶：木瓜蛋白酶按菌体干重1％的量加入厌氧发酵液中55℃自溶36小时，得酵母细胞自溶物；(6)液体代谢复合物经喷雾干燥处理；

步骤二、乳酸菌代谢物的制备(1)将保存的植物乳杆菌接种到MRS斜面培养基中，37℃静止培养48小时，得到复活的菌种；(2)将复活的植物乳杆菌接种至优化后的液体MRS培养基中得一级种子液；(3)将一级种子液以4％的量接种至液体厌氧培养基中37℃厌氧发酵24h得厌氧发酵产物(4)厌氧发酵代谢物经喷雾干燥处理；

步骤三、将喷雾干燥的酵母代谢产物和植物乳杆菌代谢产物按1：1质量配比进行复配，得到复合微生物代谢物组即为终产物。