[发明专利]钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法有效
申请号: | 201410262215.0 | 申请日: | 2014-06-13 |
公开(公告)号: | CN103995122A | 公开(公告)日: | 2014-08-20 |
发明(设计)人: | 杨云慧;王勤;牛司朋;唐赛赛;尹寒蕊;崔光鑫;黄贵春;郑丽 | 申请(专利权)人: | 云南师范大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 昆明科阳知识产权代理事务所 53111 | 代理人: | 李行健 |
地址: | 650500 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合金 纳米 免疫 层析 试纸 检测 微囊藻 毒素 lr 方法 | ||
1.一种钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法,其特征在于:首先以Pd纳米颗粒为晶种子制备出具有中空结构的Pd-Au双金属纳米笼,并用于标记微囊藻毒素-LR单克隆抗体喷涂到结合垫,于检测线上喷涂BSA偶联微囊藻毒素-LR,以羊抗鼠IgG喷涂控制线制得用于快速检测水体中微囊藻毒素-LR的免疫层析片条,用竞争免疫层析法,通过读取检测线上滞留的金纳米笼-微囊藻毒素抗体结合物的灰度值,对试样中微囊藻毒素-LR进行定量分析。
2.如权利要求1所述的钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法,其特征在于:将54~56mL PVP,298~302mgL-抗坏血酸、1498~1502mg KBr和284~286mg氯钯酸混合并加热至沸腾,在匀速搅拌下反应2.9~3.5小时,冷却到室温后,离心分离产物,并用无水乙醇和去离子水反复冲洗三到五次,以除去其中溶解的溴化物,所得产物密封保存做下一步合成的种子;用以上一步合成的Pd纳米笼作为晶种子合成Pd-Au纳米笼颗粒,取19~21ml的去离子水,加入0.48~0.51ml已浓缩好的Pd纳米立方体溶液,4.9~5.1mgPVP和2.9~3.1mgL-1抗坏血酸,将此混合液加热到沸腾反应19~21min,并保持匀速搅拌,将10-12mg氯金酸分散到1.9~2.1ml的去离子水中,并逐滴加入到上述反应液中,再将该混合液加热至沸腾状态反应14~16min,待温度冷却到室温,离心分离产物,用无水乙醇和去离子水洗涤,浓缩即得。
3.如权利要求2所述的钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法,其特征在于:以PBS为测试底液,T线喷涂两次,每次测试时滴加的金纳米笼标记单克隆抗体量为3μL,以HF135型号的硝酸纤维膜制作片条。
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