[发明专利]LDV修饰的5-氟尿嘧啶，其制备，纳米结构，活性及应用

说明书

技术领域

本发明涉及5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val。简称是LDV。涉及它的制备方法，涉及它的纳米结构，涉及它的体内外抗肿瘤作用，涉及它抗肿瘤细胞粘附侵袭和迁移的作用。因而本发明涉及它在制备抗肿瘤药物，制备抗肿瘤细胞迁移粘附和侵袭药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术

5-氟尿嘧啶是一临床常用的抗肿瘤药物，它可用于多种癌症的治疗，胃癌，肝癌，结肠等。虽然5-氟尿嘧啶对于肿瘤的治疗有不错的疗效，但其也存在一些不容忽视的问题。例如体内半衰期短，口服生物利用度低，给药剂量与中毒剂量相近，毒副作用大。为了能更好地发挥5-氟尿嘧啶的抗肿瘤作用，提高其抑瘤效果、减少毒副作用。多年来人们对5-氟尿嘧啶进行了大量的修饰工作，合成了多种5-氟尿嘧啶衍生物，如在5-氟尿嘧啶上引入葡萄糖、卟啉类化合物，金属配合物，氨基酸和短肽等。遗憾的是这些努力并没有获得期待的结果。在5-氟尿嘧啶的结构修饰中，还有将RGD三肽引入的合成研究。因为在一些重要的研究中，RGD三肽已确认对整合素受体没有识别作用，所以这种修饰是一种目标含糊的化学工作，对5-氟尿嘧啶没有任何生物学意义。

RGD四肽，即RGDS，RGDF和RGDV是整合素α_Vβ₃的阻断剂，具有抗血栓和抗细胞粘附活性。层粘连蛋白-111(laminin-111)参与到肿瘤的生长、浸润、转移、粘附和血管生成等多个生理过程。申请人也曾经用氨基酸修饰四氢-β-咔啉-3-羧酸、β-咔啉-3-羧酸及1-位取代的β-咔啉-3-羧酸，包括1-位取代的四氢-β-咔啉-3-羧酸或1-位取代的β-咔啉-3-羧酸制备高效的抗血栓剂或抗肿瘤剂。图1是发明人创造的结构类型的代表。尽管发明人付出了大量研究精力，筛选了数百种化合物，一直没有得到同时具有抗肿瘤和抗肿瘤粘附浸润和迁移作用的化合物。

发明人在分析数百种化合物的结构及活性变化的基础上，认识到将LDV与5-氟尿嘧啶偶联，形成的5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val会同时具有抗肿瘤和抗肿瘤细胞粘附浸润和迁移作用。基于这个认识，发明人提出了本发明。

发明内容

本发明的第一个内容是提供下面结构的5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val。

本发明的第二个内容是提供5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val的制备方法，该方法由以下步骤构成：

(1)60℃5-氟尿嘧啶在溴乙酸乙酯溶液，30％NaOH的水溶液中反应10h，然后在冰水浴，浓盐酸存在下形成5-氟尿嘧啶-1-基乙酸；

(2)采用液相合成制备Leu-Asp(OBzl)-Val-OBzl；

(3)将Leu-Asp(OBzl)-Val-OBzl与5-氟尿嘧啶-1-基乙酸偶联，制备5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp(OBzl)-Val-OBzl；

(4)将5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp(OBzl)-Val-OBzl脱保护，制备55-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val。

本发明的第三个内容是评价5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val的抗细胞增殖活性。

本发明的第四个内容是评价5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val对荷S180小鼠肿瘤增长的抑制作用。

本发明的第五个内容是评价5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val抗肿瘤细胞粘附，侵袭和迁移作用。

附图说明

图1.发明人创造的抗肿瘤活性化合物的结构类型代表，式中AA为L-氨基酸或甘氨酸。

图2.5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val的合成路线.i)DCC，HOBt，NMM，THF；ii)氯化氢/乙酸乙酯溶液(4N)；iii)CH₃OH，2NNaOH；iv)NaOH(30％)，60℃，溴乙酸乙酯，浓HCl。

图3.5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Asp-Val在纯水溶液中1×10^-5M浓度下的透射电镜照片。

具体实施方式

为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

实施例1制备5-氟尿嘧啶-1-基乙酸