[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法及应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1单菌落接种在LB液体培养基中，在20～40℃下培养过夜；然后转接至种子培养基中，在20～40℃下培养5h，再转接至发酵培养基中，在20～40℃下培养36～72h；其中种子培养基和发酵培养基是在LB液体培养基中添加质量分数为0.5～5％的葡萄糖或蔗糖作为附加碳源；

2)培养完成后，离心，收集培养液上清；

3)将培养液上清依次经酸沉淀、冻干后得到解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽。

2.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法，其特征在于：所述步骤1)的具体步骤是将解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1单菌落接种在LB液体培养基中，在20～40℃下、150～250rpm恒温摇床中培养过夜，得到培养物；然后按照1～3％的转接量将培养物转接至种子培养基中，在20～40℃下、150～250rpm恒温摇床中培养5h，得到种子培养物；再按1～3％的转接量将种子培养物转接至发酵培养基中，在20～40℃下、150～250rpm恒温箱中培养36～72h。

3.根据权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法，其特征在于：所述步骤2)中的离心是在10000rpm、10min、4℃的条件下离心收集培养液上清。

4.根据权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法，其特征在于：所述的骤3)的具体步骤是调节培养液上清的pH值小于等于2.0，混匀后在4℃下静置，然后离心收集沉淀，将沉淀冷冻干燥后即为提取的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽。

5.根据权利要求4所述的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽的提取方法，其特征在于：所述的步骤3)中用浓度为6mol/L的盐酸调节培养液上清的pH值；静置时间为12～24h；离心是在10000rpm、10min、4℃的条件下离心收集沉淀。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的提取方法提取的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽在制备抗菌药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的抗菌药物为抗革兰氏阳性菌药物和或抗革兰氏阴性菌药物。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述的抗革兰氏阳性菌药物为抗产黑色素蜡样芽孢杆菌药物、抗蜡样芽孢杆菌药物、抗枯草芽孢杆菌药物、抗金黄色葡萄球菌药物中的一种或几种；

所述的抗革兰氏阴性菌药物为抗大肠杆菌药物、抗沙门氏菌药物、抗痢疾志贺氏菌药物中的一种或几种。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述的抗大肠杆菌药物为抗大肠杆菌O157：H7药物。

10.根据权利要求1-5中任意一项所述的提取方法提取的解淀粉芽孢杆菌胞外抗菌脂肽在制备生物型抑菌剂、免疫佐剂、食品添加剂、饲料添加剂、化妆品添加剂及保健食品中的应用。