[发明专利]1-(乙基氨基酸苄酯)-β-咔啉-3-羧酸苄酯,纳米结构,制备,活性和应用

说明书

技术领域

本发明涉及1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯及其制备方法，涉及它抑制肿瘤细胞增殖的活性，涉及它对荷S180小鼠肿瘤生长的抑制作用，进一步涉及它逆转肿瘤细胞耐药的作用。因而本发明涉及它在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

技术背景

近年来，鉴于全球癌症发病率和死亡率急剧上升，癌症已经成为了一个世界问题。我国的癌症患者人数处于世界前列，癌症患者人数不断增加，对抗肿瘤药的需求也不断增加。目前临床应用的抗肿瘤药物存在许多局限性，随着科技的进步以及科学的发展，寻找安全有效的抗肿瘤新药是药物研究的热点之一。

癌症是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。使用的其它术语为恶性肿瘤和赘生物。据世界卫生组织统计，癌症是世界上的头号死因之一，尤其是在发展中国家。而全世界癌症死亡人数预计将继续上升，到2030年将超过1310万。因此，开发新的高效，低毒，毒副作用小的抗肿瘤药物一直是新药研究的重要课题之一。

随着对肿瘤特性和发病本质的认识，最近几年抗肿瘤药物不断从传统的细胞毒药物向发展非细胞毒药物过渡。β-咔啉是天然来源的细胞毒性抗肿瘤化合物。发明人认识到，β-咔啉抗肿瘤的细胞毒性本质是与肿瘤细胞DNA之间的嵌插。这种形式的扦插可造成细胞毒性。发明人曾经发现，β-咔啉可以插入肿瘤细胞DNA之间的双螺旋碱基之间。在进一步的研究中，发明人认识到，β-咔啉的抗肿瘤活性来自嵌插。发明人还认识到，在β-咔啉的1位引入二肽生成β-咔啉-3-羧酸苄酯及衍生物可增强β-咔啉与肿瘤细胞的作用，增强抗肿瘤活性。根据这些认识，发明人提出1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯。与发明人前期的发明1-(乙基-AA-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯相比，本发明的突出创造性在于，保留了β-咔啉与肿瘤细胞DNA之间的嵌插作用，在低剂量下显示高抗肿瘤活性。于是，1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯显示了良好的抑制肿瘤细胞增殖作用和抗肿瘤活性。

发明的内容

本发明的第一个内容是提供下式的1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯。

本发明的第二个内容是提供1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯的制备方法，该方法包括：

(1)将L-色氨酸苄酯在三氟醋酸的催化下与1，1，3，3-四甲氧基丙烷进行Pictet-Spengler缩合，得到1-(2，2-二甲氧乙基)-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸苄酯；

(2)将1-(2，2-二甲氧乙基)-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸苄酯在四氢呋喃中，用高锰酸钾水溶液氧化得到1-(2，2-二甲氧乙基)-β-咔啉3-羧酸苄酯；

(3)在冰醋酸、浓盐酸、混合液中1-(2，2-二甲氧乙基)-β-咔啉3-羧酸苄酯水解为1-乙醛基-β-咔啉3-羧酸苄酯；

(4)将1-乙醛基-β-咔啉3-羧酸苄酯与HCl·Val-Glu(OBzl)-OBzl偶联得到1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯。

本发明的第三个内容是评价1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯抑制肿瘤细胞增殖的作用。

本发明的第四个内容是评价1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯抑制S180肿瘤小鼠肿瘤生长的作用。

本发明的第五个内容是测定1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯逆转肿瘤细胞耐药的作用。

本发明的第六个内容是阐述1-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯的纳米结构。

附图说明

图11-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯的合成路线.i)多聚磷酸，苯甲醇；ii)三氟醋酸，1，1，3，3-四甲氧基丙烷；iii)高锰酸钾，四氢呋喃，水；iv)溶浓盐酸，冰醋酸，水；v)N-甲基吗啉，无水硫酸镁，氰基硼氢化钠，Val-Glu(OBzl)-OBzl。

图21-(乙基-Val-Glu(OBzl)-OBzl)-β-咔啉-3-羧酸苄酯在pH7.4环境中，浓度为6×10^-7M浓度下的透射电镜照片。