[发明专利]一种用于植物寄生线虫基因组DNA微量提取的裂解液及其应用

权利要求书

1.一种用于植物寄生线虫基因组DNA微量提取的裂解液，其特征在于，所述裂解液的配方包含：

10mM Tris-HCl(pH8.3)，1.5mM MgCl₂，60mM KCl，10mg/mL TritonX-100，0.2mM DTT和300μg/mL Proteinase K。

2.根据权利要求1所述的裂解液的制备方法，其特征在于：

所述裂解液由10×PCR Buffer、100mM的KCl溶液、100mg/mL的TritonX-100溶液、3000μg/mL的Proteinase K溶液、1mM的DTT溶液和双蒸水按1∶1∶1∶1∶2∶4的体积比混合配制而成，所述10×PCR Buffer含15mM的Mg²⁺。

3.根据权利要求1所述的裂解液用于植物寄生线虫基因组DNA微量提取的应用，其特征在于：

首先用双蒸水将线虫清洗干净，然后挑取单条线虫放入含5～20μL所述裂解液的PCR管中，最后56℃保温0.5～4h，95℃加热10min。经上述步骤提取获得的上清液即可用于分子实验。

4.根据权利要求3的应用，其特征在于，裂解液的使用量为10～15μL，56℃保温的时间为1～3h。

5.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述植物寄生线虫为穿刺短体线虫(Pratylenchus penetrans)、斯氏短体线虫(Pratylenchus scribneri)、松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)、拟松材线虫(B.mucronatus)、水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)。