[发明专利]假交替单胞菌胞外多糖在抑制乳腺癌细胞增殖中的应用

权利要求书

1.一种假交替单胞菌(Pseudoaltermonas sp.)S-5胞外多糖在制备抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖药物中的应用；所述的胞外多糖按如下步骤制备：

(1)将菌种保藏号为CGMCC NO.3433的假交替单胞菌(Pseudoaltermonas sp.)S-5经活化、扩大培养后，制得扩繁菌种；

(2)将步骤(1)制得的扩繁菌种接种于发酵培养基中，向发酵培养基中加入发酵培养基重量0.3％的灭菌豆油后，7-9℃有氧搅拌培养50～60h，搅拌速度160～170r/min，得液体发酵液；

(3)将步骤(2)制得的液体发酵液离心，收集上清液；

(4)将步骤(3)制得的上清液在50～60℃条件下，旋转蒸发浓缩至原体积的1/4，得浓缩液，然后向浓缩液中加入体积百分比为95％的乙醇，经醇沉后，离心，收集沉淀；

(5)将步骤(4)收集的沉淀用水溶解，加入1/3体积的seveage试剂脱去蛋白质，制得粗糖溶液；

(6)将步骤(5)制得的粗糖溶液通过大孔树脂D-301R脱色后，再经过DEAE-Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-75层析柱分离，制得纯化的胞外多糖溶液；

(7)将步骤(6)制得的胞外多糖溶液经真空冷冻干燥后，制得适冷微生物胞外多糖纯品；

所述步骤(2)中的发酵培养基组分如下，均为重量百分数：蛋白胨0.5％，酵母粉0.1％，葡萄糖2％，氯化钠2％，人工海水余量，pH7.0。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的胞外多糖成分如下：

假交替单胞菌(Pseudoaltermonas sp.)S-5胞外多糖的分子量为397kDa，由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，其摩尔比为4.8:50.9:44.3。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物包括药效成分为假交替单胞菌S-5胞外多糖以及药学上可接受的辅料。