[发明专利]一种检测牛GHR基因的特异性引物、其荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法和应用在审
| 申请号： | 201410253556.1 | 申请日： | 2014-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN104313125A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 裴杰;褚敏;梁春年;郭宪;包鹏甲;冯瑞林;朱新书;丁学智;阎萍 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人： | 高松 |
| 地址： | 730000 甘肃省*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 ghr 基因 特异性 引物 荧光 定量 pcr 试剂盒 及其 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测牛GHR基因的特异性引物，其核苷酸序列为：
上游序列为5’-AACCACCACCCAATACAG-3’，
下游序列为5’-CAACGAGTACATCGGAAC-3’。
2.一种牛GHR基因的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括PCR反应液、Taq DNA聚合酶混合物、SYBR Green染料和引物；所述引物序列为：
上游序列为5’-AACCACCACCCAATACAG-3’，
下游序列为5’-CAACGAGTACATCGGAAC-3’。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括阳性对照和阴性对照。
4.一种牛GHR基因的定量检测方法，是以待测cDNA为模板，利用权利要求1所述的引物和SYBR Green染料进行实时荧光定量PCR，记录Ct值，并以GHR标准基因作为阳性对照绘制标准曲线，据此标准曲线和Ct值进行定量测定。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述实时荧光定量PCR的反应条件是：95 ℃预变性30秒；95 ℃ 5秒，56 ℃ 20秒，捕捉荧光信号，循环40次。
6.权利要求2或3所述的试剂盒在定量检测牛GHR基因中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述牛为奶牛、黄牛和牦牛。
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