[发明专利]一种全血样本快速裂解试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201410251359.6 | 申请日: | 2014-06-09 |
公开(公告)号: | CN104611324A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 张钦;张平;周正峰;朱坤 | 申请(专利权)人: | 南京美宁康诚生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
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地址: | 210061 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血样 快速 裂解 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.一种全血样本快速裂解试剂盒,试剂盒包括:(1)装有全血样本裂解液的试剂瓶或管,和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒,其中全血样本裂解液由月桂酰基肌氨酸钠、二硫苏糖醇、pH7.4的TE组成。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征还在于全血样本裂解液中月桂酰基肌氨酸钠的最佳浓度为12g/L。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征还在于全血样本裂解液中二硫苏糖醇的浓度为40mmol/L~200mmol/L。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征还在于全血样本裂解液中pH7.4的TE由20mmol/L Tris-HCl、2mmol/L EDTA组成,pH为7.4。
5. 根据权利要求1所述的试剂盒,用于提取全血样本中白细胞和病原体的核酸,其中病原体包括细菌、DNA病毒及RNA病毒,核酸包括DNA和RNA。
6. 一种全血样本快速裂解的检测方法,包括如下步骤:
取抗凝全血25 μl置于离心管中,加入25 μl 全血样本裂解液,用枪头吹吸混匀;
将混合物置于95 ℃孵育2 min;
将孵育后的混合物在12,000 rpm条件下离心3 min,收集上清,即为全血样本的核酸提取物。
7. 根据权利要求6所述的检测方法,其中全血样本的核酸提取物可直接用于PCR扩增或荧光PCR检测,也可置于-20 ℃长期保存。
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