[发明专利]一种提高液体酶稳定性的组合物

说明书

技术领域

本发明属于酶制剂技术领域，具体涉及一种提高液体酶稳定性的组合物及其应用方法。

背景技术

随着生物科技的不断发展，酶制剂在工业、食品及饲料行业中的应用越来越广泛。其中液体酶是酶制剂的主要剂型，其占有的市场份额不断扩大。酶是一种具有生物活性的蛋白质，只有维持其特定的空间结构，才能具有活性。而酶的三维结构是由疏水作用、静电作用、氢键及二硫键维持的，在液体状态下酶分子处于舒展的状态，活性中心裸露，很容易受化学、物理和生物等因素的影响，发生氧化、水解等反应而使酶分子的空间结构改变，失去活性，造成酶蛋白的聚集沉淀，既导致产品酶活下降，也影响产品外观，从而限制了液体酶制剂的市场推广。

目前市售的大多数液体酶制剂产品主要采用如下方法来解决稳定性的问题：1)通过对酶蛋白分子进行一定的化学修饰提高其稳定性，例如：利用一些小分子物质(糖类、多羟基醇类等)与酶蛋白分子表面的-NH、-OH或-COOH等基团发生反应，改变侧链的结构，防止氧化、水解等反应的发生，从而提高酶分子的稳定性；2)选择合适种类的稳定剂及合适的浓度提高酶的稳定性，能够提供适宜的渗透压，使酶分子处于相对脱水的状态，多为无机盐类或多羟基醇类；3)确定液体酶的最适pH范围，pH是影响液体酶稳定性的关键因素之一。

目前市售的液体酶制剂产品多数在6个月内较稳定，但储存期限超过6个月后，酶活降低得很快，严重限制了液体酶的推广和使用。

发明内容

本发明为解决现有技术问题，提供了一种能够提高液体酶稳定性的组合物及其应用方法，从而满足液体酶长期储存的需要。

本发明一方面提供了一种组合物，该组合物包含有丙二醇、蔗糖、麦芽糊精和氯化钙；其中蔗糖和麦芽糊精占组合物总重量的15％-55％，蔗糖与麦芽糊精的质量比为1：2-4。

所述组合物，各组分及其占组合物总重量的百分比分别为：

所述组合物，各组分及其占组合物总重量的百分比分别为：

本发明另一方面提供了上述组合物在液体酶中的应用。

所述组合物在液体酶中的添加比例为0.15-0.35g/mL。

本发明提供的组合物能有效提高纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶等液体酶制剂的稳定性，使液体酶制剂在37℃条件下储存8个月后，仍能保持80％以上的酶活，稳定性优于市售国外酶制剂产品。本发明所述组合物中各组分之间产生了协同促进作用，添加组合物的酶制剂的残余酶活比单独添加等量丙二醇、蔗糖、麦芽糊精或氯化钙的酶制剂的最高残余酶活还要高出10％-17％，取得了意料不到的技术效果。本发明所述组合物能有效延长液体酶制剂的储存期限，因此有利于液体酶的推广和使用。

具体实施方式

申请人在长期的研究中发现，蔗糖和麦芽糊精的含量对本发明所述组合物的稳定效果影响较大，在相同添加量的情况下，当组合物中蔗糖和麦芽糊精的含量在15％-55％的范围内时，组合物对酶制剂的稳定效果明显，当蔗糖和麦芽糊精的含量低于15％或高于55％时，酶制剂的残余酶活显著降低；且当蔗糖和麦芽糊精的质量比在1：2-4范围内时，组合物的稳定效果最佳，尤其是蔗糖和麦芽糊精的质量比为1：3时，添加该组合物的酶制剂在相同条件下储存8个月，残余酶活仍高达85％以上，取得了意料不到的效果。

下面结合具体的实施方案对本发明进行更详细的描述。但本发明并不受所述实施例的限制。提供实施方案的目的是为了使说明书全面而透彻，并向本领域的技术人员全面传达发明的范围。除另定义外，本发明所使用的所有技术和科学术语均具有作为本发明所属技术领域中普通技术人员通常理解的同样的含义。

本发明所用仪器设备为行业内常用设备，所用原料和试剂可选自市售任意一种，例如：丙二醇、蔗糖、麦芽糊精和氯化钙均可选购自国药集团；实施例4所述市售国外的纤维素酶、木聚糖酶和脂肪酶产品均可购自杰能科生物工程有限公司。

实施例1

一种组合物，各组分及其占组合物总重量的百分比分别为：

将上述的各个组分混合均匀制成组合物。

实施例2

一种组合物，各组分及其占组合物总重量的百分比分别为：

实施例3

一种组合物，各组分及其占组合物总重量的百分比分别为：

实施例4液体酶制剂稳定性测试

将上述组合物按0.15-0.35g/mL比例添加到液体酶(未添加稳定剂)中。