[发明专利]一种柑橘生物复合防霉保鲜剂及制备和使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及柑橘保鲜技术领域，具体涉及到采用生物防霉保鲜剂对柑橘进行保鲜及防霉保鲜剂的制备和使用方法。

背景技术

果蔬是人类的主要食物之一，但是果蔬受区域性和季节性的影响，容易发生腐败变质。果蔬的腐败变质会造成不必要的金钱损失，并且造成果蔬品质的降低，其中食源性病菌可产生大量的毒素，使人们引发消化道疾病、免疫疾病和炎症等疾病。传统的化学防霉保鲜液有毒性大，容易引起人的过敏和中毒，而新型的生物保鲜液仅是蛋白、多肽、某些脂质和有机酸等，对人体没有毒副作用或者是毒副作用非常小。生物保鲜液是从生物中直接分离提取的一类具有抑菌作用的物质，根据来源可以分为三种类型，即动物源天然保鲜液、植物源天然保鲜液和微生物源天然保鲜液。因此，新型安全有效的果蔬生物防霉保鲜液的研发迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术对生物保鲜液研究与开发的不足，提供一种柑橘生物复合防霉保鲜剂及制备和使用方法。

本发明的柑橘生物复合防霉保鲜剂由下列质量、体积份原料组成：冰醋酸1份，壳聚糖2-3份，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) HRH.317发酵液1.5-2份，吐温-80 1.5-2份，NaCl 0.3-0.5份，蒸馏水93份。

本发明的柑橘生物复合防霉保鲜剂的制备方法包括如下步骤：

(1) 在93份蒸馏水中加入1份(V/V)的冰醋酸制成醋酸溶液；

(2) 在(1)制备的醋酸溶液中分别加入2-3份(W/V)的壳聚糖、1.5-2份(V/V)的解淀粉芽孢杆菌HRH317发酵液、1.5-2份(W/V)的吐温-80和0.3-0.5份 (W/V)的NaCl，搅拌均匀即可。

本发明的柑橘生物复合防霉保鲜剂为无色或略带浅黄色透明的液体。

所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) HRH.317菌株已由山西农业大学在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏并申请专利，保藏号为CGMCC JL/0136，专利申请号为201310187052.X。

所述的解淀粉芽孢杆菌HRH.317发酵液的制备方法包括如下步骤：

(1) 制备液体培养基  在100份蒸馏水中加入0.5份牛肉膏、1份蛋白胨和0.5份NaCl，调节pH至 7.2后，121℃、20分钟灭菌，制成培养液备用；

(2) 解淀粉芽孢杆菌HRH317的活化 在无菌条件下，将解淀粉芽孢杆菌HRH.317以接种环接种于(1)制备的培养液中，在37℃条件下，转速为150 r/min的恒温摇床中振荡培养24 h，作为种子液备用；

(3) 将(2)活化好的种子液，以1%(V/V)接种量接入(1)制备的液体培养基中，在转速为150 r/min的恒温摇床中振荡培养24 h，获得解淀粉芽孢杆菌HRH.317基础发酵液；

(4)将(3)制备的基础发酵液接入(1)制备的液体培养基中，在36-38℃、160 r/min条件下，培养20-24 h，扩大培养得到发酵液，发酵液活菌数为10⁷—10⁸ cfu/mL。

解淀粉芽孢杆菌HRH.317发酵液经过实验动物急毒实验证明是安全的。

本发明的柑橘生物复合防霉保鲜剂的使用方法包括如下步骤：

(1)  将无干枯、无损伤、无病害的柑橘，用自来水清洗后浸入0.1%的次氯酸钠溶液中消毒1-2 min，取出后用无菌水清洗挂果的次氯酸钠，并晾干；

(2) 将晾干后的柑橘完全浸入本发明的生物复合防霉保鲜剂，浸泡30-40秒钟，捞出完全晾干后用厚度为0.2-0.4 mm的PE(聚乙烯)保鲜袋(事先在袋上每间隔15 cm处打孔，孔直径为1 cm)分装，每袋25-40个果实，留1/4袋口空间，放入塑料筐内置于室温18-23℃和室内相对湿度70%-80%的条件下或置于贮藏温度4-6℃、相对湿度70%-80%的条件下贮藏。

本发明的柑橘生物复合防霉保鲜剂的防霉保鲜效果试验

1 试验方法  

1.1 试验材料：外皮完好的柑橘400个。

1.2 处理方法：A 用本发明的生物复合防霉保鲜剂处理外皮完好的柑橘，处理方法同上述使用方法；B 对照1为外皮完好的柑橘；C用本发明的生物复合防霉保鲜剂处理人工刺破外皮完好的柑橘外皮接种青霉孢子，处理方法同上述使用方法；D 对照2为人工刺破外皮完好的柑橘外皮接种青霉孢子；处理量各100个果实。