[发明专利]一种环糊精糖基转移酶及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201410236224.2 | 申请日: | 2014-05-29 | 
| 公开(公告)号: | CN104017784A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 | 
| 发明(设计)人: | 邢将军 | 申请(专利权)人: | 江苏诚信制药有限公司 | 
| 主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/60 | 
| 代理公司: | 上海三和万国知识产权代理事务所(普通合伙) 31230 | 代理人: | 章鸣玉 | 
| 地址: | 226221 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 环糊精 糖基转移酶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种环糊精糖基转移酶,其特征是:所述环糊精糖基转移酶为SEQ ID NO:2所示氨基酸序列在55位、77位、121位、331位、543位、604位或615位有1-5个的氨基酸残基置换的突变体。
2.根据权利要求1所述的环糊精糖基转移酶,其特征是:所述环糊精糖基转移酶为SEQ ID NO:4、6、8、10、12、14、16、18所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1所述的环糊精糖基转移酶,其特征是:所述环糊精糖基转移酶为SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。
4.一种编码权利要求2所述环糊精糖基转移酶的氨基酸序列的核苷酸序列,如SEQ ID NO:3、5、7、9、11、13、15、17所示。
5.一种编码权利要求3所述环糊精糖基转移酶的氨基酸序列的核苷酸序列,如SEQ ID NO:3所示。
6.一种制备权利要求1-3所述环糊精糖基转移酶的方法,包括如下步骤:提取和扩增编码野生型CGT酶的DNA序列,利用易错PCR、定向进化技术建立突变文库,经筛选,获得所述新型环糊精糖基转移酶。
7.一种权利要求1-3所述环糊精糖基转移酶在制备2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸上的应用。
8.根据权利要求7所述环糊精糖基转移酶在制备2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸上的应用,其特征是:所述在制备2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸上的应用为将β-环糊精与抗坏血酸溶于水中,调节pH为5-7,加入所述新型环糊精糖基转移酶,在温度30-60℃反应,终止反应,经分离纯化得到2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸。
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