[发明专利]一种测定多糖糖组分的分析方法

权利要求书

1.一种测定多糖糖组分的分析方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)离子液预处理及多糖再生：将待测多糖与离子液在油浴锅中充分溶解得到多糖溶解液，待所述多糖溶解液冷却后倒入再生溶剂中得到沉淀，反复冲洗，离心得到再生多糖粗产品，通风使再生多糖粗产品内残余的再生溶剂完全挥发，干燥后得到再生多糖；

(2)酸溶剂水解：将步骤(1)所得再生多糖与酸溶剂混合置于安培瓶中并密封，将密封后的安培瓶放入油浴锅中进行水解反应，水解反应结束后进行离心，取上清液进行检测前处理，得到多糖检测液；

(3)离子色谱-脉冲安培法检测单糖组分：采用离子色谱仪系统，应用离子色谱-脉冲安培法分析多糖检测液中单糖组分的还原糖种类和含量。

2.根据权利要求1所述的测定多糖糖组分的分析方法，其特征在于在步骤(1)中：

所述离子液为1-丁基-3-甲基咪唑氯盐、1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐、1-烯丙基或3-甲基咪唑氯盐中的一种以上；

所述待测多糖与离子液的质量比为1:(15～25)；

所述充分溶解的条件为：溶解温度为80～100℃，溶解时间为2～4h；

所述多糖溶解液冷却后的温度为50℃；

所述再生溶剂为无水乙醇或水；

所述再生溶剂的用量为离子液体积的5～10倍；

所述干燥的条件为：干燥温度为50～80℃，真空度为0.05～0.1KPa，干燥时间为2～5h。

3.根据权利要求1所述的测定多糖糖组分的分析方法，其特征在于在步骤(2)中：

所述酸溶剂为三氟乙酸、硫酸或盐酸中的一种以上；

所述酸溶剂的浓度为2～4mol/L；

所述酸溶剂的用量为：每g再生多糖对应使用10mL的酸溶剂；

所述水解反应的条件为：反应温度为70～120℃，反应时间为2～4h；

所述离心的条件为：转速为7000r/min，时间为10min；

所述检测前处理的具体步骤为：用超纯水对上清液进行定容，稀释后过0.2μm滤膜。

4.根据权利要求1所述的测定多糖糖组分的分析方法，其特征在于在步骤(3)中：所述离子色谱仪系统采用在线脱气装置的梯度泵，配25μL进样环的柱温箱、自动进样器和配有薄膜型安培池的电化学检测器，色谱柱采用CarboPacTM PAl分析柱(4mm×250mm)和CarboPacTM PAl保护柱(4mm×50mm)，柱温30℃，流动相流速固定在1.0mL/min，进样体积固定在20μL。

5.根据权利要求4所述的测定多糖糖组分的分析方法，其特征在于：所述离子色谱仪系统中色谱柱的淋洗条件为：水和300mmoL/L的NaOH溶液以二元梯度淋洗方式进行色谱分离，在最初的20min，采用体积分数为95％水和5％的300mmoL/L的NaOH溶液二元混合液等度淋洗方式，然后以台阶改变方式在0.1min内将淋洗液变为100％的300mmoL/L NaOH溶液，并保持25min。