[发明专利]一种非诊疗目的禽肿瘤性病毒多重PCR检测方法有效
| 申请号： | 201410236110.8 | 申请日： | 2014-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN103981288A | 公开（公告）日： | 2014-08-13 |
| 发明（设计）人： | 成子强;徐晨 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 诊疗 目的 肿瘤 性病 多重 pcr 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种非诊疗目的禽肿瘤性病毒多重PCR检测方法，其特征在于，针对REV、MDV、ALV-J和ALV-A病毒的保守基因采用了4对特异性引物，其序列如下表所示：
利用上述4对引物对待测物进行多重PCR扩增反应，其多重PCR扩增反应体系如下，每25μL体系为：
多重PCR反应条件为：放入PCR仪中心，以尽量避免边缘效应，编辑程序如下：第一步：95℃15min；第二步：95℃30s、53℃1min30s、72℃1min30s，连续35-40个循环；第三步72℃10min；最后保存于4℃；
PCR反应完成后，向反应液中加入6×上样缓冲液，配置加入核酸染色剂的1.5％的琼脂糖凝胶进行核酸电泳，即可检测获得结果。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：多重PCR反应条件中连续40个循环。
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