[发明专利]一种用于筛选肽类和非肽类GLP-1类似物的细胞株及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201410234121.2 | 申请日： | 2014-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN103966171A | 公开（公告）日： | 2014-08-06 |
| 发明（设计）人： | 姚洪玉;魏云林;张敏;张宽仁;刘东波;季秀玲 | 申请（专利权）人： | 昆明贝尔吉科技有限公司;昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12Q1/02;G01N21/64;C12R1/91 |
| 代理公司： | 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙) 53108 | 代理人： | 马晓青 |
| 地址： | 650106 云南省昆明市高新区*** | 国省代码： | 云南;53 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 筛选 非肽类 glp 类似物 细胞株 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一株GLP-1R/U2OS细胞株，其特征在于由下述方法获得：构建人胰高血糖素样肽-1受体荧光蛋白真核表达载体GLP-1R/pCMV6，并稳定转染人骨肉瘤U2OS细胞，获得一株GLP-1R/U2OS细胞株。
2.根据权利要求1所述的GLP-1R/U2OS细胞株含有的荧光蛋白XFP是GFP、YFP、RFP或任何具有荧光性质的蛋白。
3.根据权利要求1所述的GLP-1R/U2OS细胞株或其它适用的细胞如HEK293细胞，其特征在于由下述方法获得：先构建人胰高血糖素样肽-1受体GLP-1R绿色荧光蛋白GFP真核表达载体GLP-1R/pCMV6，再按Lipofectamine2000操作说明书进行转染U2OS细胞，G418加压筛选2周，获得具有抗生素抗性的阳性细胞克隆，扩增培养即为稳定表达人GLP-1R的U2OS细胞系，命名为GLP-1R/U2OS细胞株。
4.用权利要求1所述的GLP-1R/U2OS细胞株测定GLP-1类似物生物活性的方法，其特征在于：转染了XFP标记的GLP-1R基因条件下，在受体激动剂刺激下诱导GLP-1R/U2OS细胞内产生荧光斑点，转染的GLP-1R稳定表达。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述的受体激动剂为GLP-1类似物，GLP-1受体与配体结合后细胞内产生荧光斑点强度与受体激动剂的活性呈正相关，用高内涵系统观察分析测定GLP-1R/U2OS细胞内荧光斑点强度，测定受体激动剂的生物活性。
6.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述的GLP-1类似物为促胰岛素分泌肽Exendin-4。
7.如权利要求4所述的方法，其特征在于用高内涵系统观察GLP-1R的表达情况结果，用GLP-1R/U2OS细胞内荧光斑点平均强度变化测定GLP-1类似物和GLP-1R生物活性物包括GLP-1受体激动剂、拮抗剂和调节剂等。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于昆明贝尔吉科技有限公司;昆明理工大学，未经昆明贝尔吉科技有限公司;昆明理工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410234121.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：从血液中提取核糖核酸的方法
- 下一篇：一种内喷涂复合钢管加热传导缓冲架
