[发明专利]一种从香菇废菌棒直接提取香菇活性多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及到一种从香菇栽培废菌棒直接提取活性香菇多糖的方法，属于农副产物综合利用的技术领域。

背景技术

香菇是世界著名食药兼用真菌。我国是世界第一大香菇生产国。香菇风味独特，营养丰富，并具有抗癌、抗病毒、抗衰老等药用价值，深得国内外广大消费者的喜爱。大量研究表明，香菇多糖具有抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、抗感染、降血脂、抗氧化等多种生物活性，广泛应用于医药、食品、饲料等行业。作为癌症病人术后配合治疗药品，国内外均已临床应用；作为保健食品，制备成胶囊、口服液、饮料等商品形式开发应用，国内文献报道和申报的专利较多。

国内申报的香菇多糖制备技术发明专利，主要集中于从香菇子实体（包括菇柄、菇脚等加工下脚料）、发酵菌丝体和发酵液提取多糖。由于香菇子实体价格贵；从发酵菌丝体和发酵液提取多糖需要工业化发酵罐培养，存在着工序复杂和成本较高等问题。香菇栽培结束后的废弃菌棒基质，仍含有大量健壮菌丝体，蕴含着丰富的多糖类物质。而从废菌棒直接提取多糖，原料供应广泛，成本低，可以变废为宝，具有巨大的经济价值和明显的生态意义。

申请号为200810019454.8（公开号：CN101215591A）的发明专利公开了一种菇后香菇菌棒制备香菇多糖的方法，该发明采用的是香菇菌棒经过木霉菌处理后，加入到液体培养基中，发酵培养香菇菌丝体，再从菌丝体提取香菇多糖，而不是从废弃香菇菌棒直接提取多糖。该发明存在着操作工序复杂，需要投资发酵罐进行菌丝体的发酵培养，生产成本高；且香菇废菌棒经过木霉菌的转化，存在着潜在的生物安全性问题，不适合工业化生产利用。申请号为200810050633.8（公开号CN101265303A）的申报专利公开了一种以废弃香菇培养基为原料提取香菇多糖的方法，该发明采用的是水提法直接从香菇废菌棒基质提取多糖，粗多糖的得率较低（4.78%），且没有测定提取粗多糖的生物活性，提取到的香菇多糖是否具有生物活性未知，其推广应用受到限制。其他香菇多糖制备技术，均是从香菇子实体、菌丝体和发酵液为原料提取，存在着成本价格高等问题，且不具有生态效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术粗多糖得率低、工序复杂及成本价格高的问题，提供一种从香菇废菌棒直接提取香菇活性多糖的方法，采用反复优化的碱提法提取，粗多糖得率和提取率更高，且提取得到的多糖具有明显的生物活性。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种从香菇废菌棒直接提取香菇活性多糖的方法，步骤如下：

（1）原料预处理得到香菇废菌棒基质粉末；

（2）将香菇废菌棒基质粉末进行反复碱提得到浸提液；

（3）将浸提液浓缩得到粗提浓缩液；

（4）对粗提浓缩液进行醇沉分离得到粗多糖沉淀；

（5）对粗多糖沉淀除蛋白和透析之后得到多糖溶液；

（6）对多糖溶液进行浓缩、烘干处理得到香菇活性多糖；

其中所述步骤（2）的反复碱提是在60～100℃温度下，采用0.5 mol/L的NaOH溶液进行热回流浸提3小时，浸提时碱液的用量为香菇废菌棒基质粉末的10～30倍；然后离心或过滤分离上清液和沉淀，沉淀再采用香菇废菌棒基质粉末5～15倍用量的碱液重复浸提2次，合并3次浸提液；

所述步骤（5）的除蛋白是将离心后的粗多糖沉淀溶解在蒸馏水或者0.5 mol/L的NaOH溶液中，得到粗多糖溶液，然后加入粗多糖溶液1/3体积的氯仿和正丁醇溶剂，搅拌或振动处理30 min，采用离心机离心分离，收集水相部分； 

所述步骤（5）的透析是将除蛋白离心收集的水相部分装入透析袋，将透析袋口扎紧置于蒸馏水中透析3天，每12小时更换蒸馏水一次，工业化生产可采用一定孔径的超滤膜超滤处理。

所述步骤（5）除蛋白过程中氯仿和正丁醇溶剂的体积比为5：1。

所述步骤（5）除蛋白过程中离心机转速为4000～7500 r/min，离心时间10～20 min。

所述步骤（5）透析袋的分子量为8000～14000 Dal，透析袋使用前，先用50%的乙醇溶液煮沸1 h，再用50%乙醇溶液、0.01 mol/L NaHCO₃与0.001 mol/L EDTA溶液依次清洗，最后用蒸馏水冲洗干净。

所述步骤（1）的原料预处理过程是将废弃香菇菌棒先烘干至水分含量为3%～5%，然后粉碎至颗粒度80～100目，得到香菇废菌棒基质粉末。