[发明专利]应用在线固相微萃取和全二维气相色谱-四级杆质谱法检测橙汁中酯类组分的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全技术领域，涉及一种应用在线固相微萃取和全二维气相色谱-四级杆质谱法检测橙汁中酯类组分的方法。

背景技术

橙汁营养丰富，口味芳香宜人，是全球颇受欢迎、消费量大的饮料品种。其中橙汁作为主要的橙汁饮品其消费量位居世界前列。近年来，橙汁及其饮料产业随着人们认可度的提高获得了较大的发展，但由于相应质量控制体系的缺乏，其质量掺假、欺骗、有害物质超标等现象仍时有发生。

目前国标对于橙汁安全的监控主要包括基本的理化指标，如GB/T 21731-2008《橙汁及橙汁饮料》中规定可溶性固形物、蔗糖、葡萄糖、果糖和葡萄糖/果糖及橙汁含量的比值和展青霉素，故而主要的关注点也集中在基本理化指标、农药残留和微生物指标方面，如2009年“芬达系列”橙汁和柠檬饮料中测得农药严重超标；2011年8月国家质检总局对160种果蔬汁产品进行抽查约2%的橙汁饮料因菌落总数、霉菌和酵母数超标而不合格；2012年初，可口可乐生产的巴西橙汁含有少量多菌灵农药等等。但是并没有针对橙汁品质的质量标准或者检测标准体系来应对橙汁行业存在的掺假和勾兑现象。2011年台湾饮料塑化剂事件的出现也折射出国内橙汁品质监控体系的缺失，因此研究橙汁中芳香组分是建立橙汁品质标准的基础，对橙汁品质的监控具有重要意义。橙汁中酯类组分是橙汁中芳香成分的重要组成部分。对橙汁的香气具有重要的贡献。

全二维气相色谱-四级杆质谱分析技术是通过将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱以串联的方式结合起来以实现酯类物质的二维分离，在这两个色谱柱之间装有调制器，调制器起捕集再传送的作用。在GC×GC中两根柱子的分离机制是相互独立的，经第1支色谱柱分离后的每一个馏分，都先进入调制器，进行聚焦后再以脉冲方式送入到第2支色谱柱进行进一步的分离分析，每一个馏分都要同时被洗脱出进入第2根色谱柱，以免与其他馏分发生共洗脱从而影响分离效率。

现有检测果汁中酯类物质的方法采用传统的一维气相色谱-质谱法，一维气相色谱的分离能力有限，无法使得所有组分完全分离，单次分析可能只能分析几十种化合物，而全二维气相色谱-四级杆质谱分析技术检测化合物可以达到上百种，其峰容量是一维液相色谱-质谱的几百到几千倍。采用了二维正交分离，能把在一维气相色谱中无法分离的组分得到很好的分离，大大提高分离效率。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种高通量、高灵敏度 、分离效果好的应用在线固相微萃取和全二维气相色谱-四级杆质谱法检测橙汁中酯类组分的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种应用在线固相微萃取和全二维气相色谱-四级杆质谱法检测橙汁中酯类组分的方法，包括以下步骤：

1）橙汁中的酯类组分采用在线固相微萃取提取富集；

2）采用全二维气相色谱进行正交分离，四级杆质谱进行检测；

3）酯类组分定性采用保留时间指数和NIST谱库结合的方式；

4）通过节卷积技术对色谱峰纯度进行判断，对于色谱重叠峰通过不同选择离子进行准确定量分析。

具体地说，包括以下步骤：

1）橙汁中的酯类组分采用在线固相微萃取提取富集

称取5 g鲜榨橙汁于10 mL顶空进样瓶中，加入2 g NaCl，加盖密封。采用全自动固相微萃取和全自动进样方式进行样品的吸附和解吸。

在线固相微萃取条件为：萃取头为85 μm Polyacrylate自动式萃取头；样品孵化温度为45^oC；孵化平衡10 min；萃取头插入样品瓶深度为12 mm；萃取时间为20 min。

2）采用全二维气相色谱-四级杆质谱检测

使用全二维气相色谱-四级杆质谱仪检测酯类组分：由自动固相微萃取吸附富集酯类组分，吸附于萃取头上的待测物在进样口通过热解析的方式进入全二维气相色谱-四级杆质谱仪中，待测组分经一维色谱柱分离后，经调制解调器加热冷却后进入二维气相色谱柱再分离，通过四级杆质谱全扫描检测。

3）酯类组分定性分析

a) 数据分析采用GC image version 2.3；

b) C8-C20的正构烷烃标准品，采用气体进样模式，利用全二维气相色谱-四级杆质谱进行分析，获得C8-C20正构烷烃在一维和二维的保留时间，人为定义C8-C20的正构烷烃的保留时间指数，如原子个数为8的正构烷烃保留时间指数定义为800，以此类推（C原子个数×100）。