[发明专利]一种人类嗅黏膜间充质干细胞的分离培养方法在审
申请号: | 201410228728.X | 申请日: | 2014-05-28 |
公开(公告)号: | CN104031881A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 卢明;葛丽特;段答 | 申请(专利权)人: | 卢明 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 410003 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人类 黏膜 间充质 干细胞 分离 培养 方法 | ||
1.一种人类嗅黏膜间充质干细胞的分离培养方法,其特征在于按照以下步骤进行:
步骤1:配制人嗅黏膜间充质干细胞基础培养基;
步骤2:采集AS,其中AS是指autologous serum;
步骤3:将AS加入到人嗅黏膜间充质干细胞基础培养基;
步骤4:鼻黏膜放入培养皿中,用青霉素与生理盐水配比1∶1清洗3遍,清洗残余血迹;
步骤5:在培养皿中用无菌剪刀将步骤中洗浄的嗅黏膜剪成面积为1mm
步骤6:将组织块置于离心管中与培养基充分混合振荡种植于细胞培养瓶中,并置于37℃,5%CO
步骤7:细胞爬出之后换液,之后每隔3天更换一次培养基,继续培养;
所述步骤1中配制人嗅黏膜间充质干细胞基础培养基的步骤为:a:取DMEM和F12按1∶1混合而成的培养粉末,加纯净水至浓度为10~25g/L,并充分搅拌溶解,制得细胞的一般基础培养液,b:以1~10当量浓度的氢氧化钠调pH为7.0~7.5,c:层流细胞培养室抽滤消毒,4℃储存备用。
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