[发明专利]一种埃博霉素的膜提取分离工艺

权利要求书

1.一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于包括以下步骤：

 1）将埃博霉素发酵液经过有机膜过滤，得到有机膜过滤液，再以过滤液20%体积量的蒸馏水进行清洗，合并有机膜过滤液和洗液，再经陶瓷膜过滤后得到陶瓷膜过滤液；再以过滤液10%体积量的蒸馏水进行清洗，膜工作温度为25~40℃，压力为0.05Mpa~0.3Mpa；

 2）将步骤1）得到的陶瓷膜过滤液和洗液上凝胶色谱柱洗脱，HPLC检测洗脱液，收集埃博霉素a和b的总色谱纯度达到80%以上的流分,收集到的洗脱液再经纳滤膜浓缩，得到纳滤浓缩液后，将浓缩液经过正相硅胶色谱洗脱，HPLC检测洗脱液，收集埃博霉素a和b色谱纯度各达到95%以上的流分，将分别收集到的洗脱液低温结晶后分别得到埃博霉素a和b的结晶；膜工作温度为25~40℃，压力为0.05Mpa~0.3Mpa。

2.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤1）中所述有机膜规格为5000~6000截留分子量。

3.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤1）中所述陶瓷膜规格为1000~1500截留分子量。

4.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤1）中所述蒸馏水清洗流程为每次添加过滤液5%体积量的洗液进行容器和膜的润洗。

5.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述凝胶色谱柱为SephadexG-15。

6.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述凝胶色谱洗脱的洗脱液为：丙酮与石油醚按体积比为1:1~7配置而成。

7.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述纳滤膜为500~800截留分子量。

8.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述正相凝胶色谱的硅胶用量与浓缩液量的质量比为5-10 ：1。

9.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述正相硅胶色谱洗脱的洗脱液为：丙酮与石油醚按体积比为1：1~6配置而成。

10.根据权利要求1所述的一种埃博霉素的膜提取分离工艺，其特征在于：步骤2）中所述低温结晶温度为-30℃~-10℃。