[发明专利]一种产甲烷泡菌的检测方法

权利要求书

1.一种产甲烷泡菌的检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1).提取待测样品中微生物的DNA；

(2).采用特异性引物对，对步骤(1)获得的样品DNA进行荧光定量PCR扩增，读取荧光定量PCR扩增反应的初始循环数；

(3).根据公式：对样品中产甲烷泡菌进行定量，其中C_T为初始循环数，N为待测样品中产甲烷泡菌菌浓。

2.根据权利要求1所述的一种产甲烷泡菌的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的特异性引物对序列为：

正向：GTCTCACCAGAACGACTC

反向：TAAGTTTCAGCCTTGCGAC。

3.根据权利要求1所述的一种产甲烷泡菌的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的荧光定量PCR扩增的反应体系组成包括：4μL无菌水，12μL通用SYBR绿色荧光染料混合体系，25μM的正向和反向特异性引物各1μL，2μL标准样品DNA或待测样品DNA。

4.根据权利要求1所述的一种产甲烷泡菌的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的荧光定量PCR扩增的程序为将荧光定量PCR扩增的反应体系按以下程序进行反应：a)95℃保温4min；b)94℃保温45s；c)60℃保温30s；d)72℃保温45s；e)重复执行b)～d)65次；f)从65℃开始每5s增加0.5℃至达到95℃为止。