[发明专利]一种前列腺癌超声诊断靶向试剂及制备方法

权利要求书

1.一种前列腺癌超声诊断靶向试剂，所述的靶向试剂含有全氟溴辛烷纳米粒，其特征在于，所述的全氟溴辛烷纳米粒被EpDT3适体所修饰，所述的EpDT3适体选自：

a）EpDT3-SH：5' - GCGACUGGUUACCCGGUCG- (CH₂)6- SH- 3'，且具有2'-氟代嘧啶修饰，或

b）EpDT3-NH₂：5’-NH₂-spacer-GCGACUGGUUACCCGGUCG inverted T-3’，具有2'-氟代嘧啶，3’-倒置T帽，并且5’-氨基通过六乙二醇连接。

2.根据权利要求1所述的前列腺癌超声诊断靶向试剂，其特征在于，所述的EpDT3适体为EpDT3-SH，所述的靶向试剂是通过以下方法制备的：按全氟溴辛烷纳米粒表面PEG链末端的马来酰亚胺基与EpDT3-SH的疏基反应摩尔比为（1-3）:1，将全氟溴辛烷纳米乳剂与EpDT3-SH溶液混合，室温条件下缓慢搅拌反应6-10小时即得。

3.根据权利要求2所述的前列腺癌超声诊断靶向试剂，其特征在于，所述的全氟溴辛烷纳米粒是通过以下方法制备的：

    a）将PLGA-COOH溶解于二氯甲烷中，然后加入缩合剂、催化剂和N-羟基丁二酰亚胺得到活性酯改性的PLGA-NHS，再加入NH₂-PEG-MAL和缚酸剂，得到PEG修饰的共聚物PLGA-PEG-MAL；

    b）将PLGA-PEG-MAL、全氟溴辛烷加入到二氯甲烷或氯仿中，然后加入一定量的乳化剂及水，超声或均质化制得所述的全氟溴辛烷纳米粒的乳剂，再搅拌令二氯甲烷或氯仿挥发。

4.根据权利要求1所述的前列腺癌超声诊断靶向试剂，其特征在于，所述的EpDT3适体为氨基修饰的EpDT3适体，所述的靶向试剂是通过以下方法制备的：在室温下向全氟溴辛烷纳米粒混悬液中加入EDC、NHS和TEA，温和搅拌活化10-30min，再加入EpDT3-NH₂混匀，室温搅拌反应2-4h，超滤分离即得。

5.根据权利要求4所述的前列腺癌超声诊断靶向试剂，其特征在于，所述的全氟溴辛烷纳米粒是通过以下方法制备的：

a）将PLGA-COOH溶解于二氯甲烷中，然后加入缩合剂、催化剂和N-羟基丁二酰亚胺得到活性酯改性的PLGA-NHS，再加入NH₂-PEG-COOH和缚酸剂，得到PEG修饰的共聚物PLGA-PEG-COOH；

b）将PLGA-PEG-COOH、全氟溴辛烷加入到二氯甲烷或氯仿中，然后加入一定量的乳化剂及水，超声或均质化制得所述的全氟溴辛烷纳米粒的乳剂，再搅拌令二氯甲烷或氯仿挥发。

6.权利要求1所述的前列腺癌超声诊断靶向试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a）将PLGA-COOH溶解于二氯甲烷中，然后加入缩合剂、催化剂和N-羟基丁二酰亚胺得到活性酯改性的PLGA-NHS，再加入NH₂-PEG-MAL/NH₂-PEG-COOH和缚酸剂，得到PEG修饰的共聚物PLGA-PEG-MAL/PLGA-PEG-COOH；

b）将PLGA-PEG-MAL/PLGA-PEG-COOH、全氟溴辛烷加入到二氯甲烷或氯仿中，然后加入一定量的乳化剂及水，超声或均质化制得所述的全氟溴辛烷纳米粒的乳剂，再搅拌令二氯甲烷或氯仿挥发；

c）按全氟溴辛烷纳米粒表面PEG链末端的马来酰亚胺基与EpDT3-SH的疏基反应摩尔比为（1-3）:1，将PLGA-PEG-MAL制成的全氟溴辛烷纳米的乳剂与EpDT3-SH溶液混合，室温条件下缓慢搅拌反应6-10小时即得所述的靶向试剂；或者

在室温下向PLGA-PEG-COOH制成的全氟溴辛烷纳米粒混悬液中加入EDC、NHS和TEA，温和搅拌活化10-30min，再按全氟溴辛烷纳米粒表面PEG链末端的羧基与EpDT3-NH₂的氨基反应摩尔比为（1-3）:1加入EpDT3-NH₂混匀，室温搅拌反应2-4h，超滤分离即得所述的靶向试剂。