[发明专利]一种用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒及其检测方法

说明书

技术领域

本发明属于免疫分析医学技术领域，尤其涉及一种用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒及其检测方法。

背景技术

重症患者病因复杂，病情多变，虽有器官功能支持等现代医疗手段，但其死亡率仍较高。对病情进行早期准确的评估，及时给予有效地预防和治疗是改善重症患者预后的重要途径。如何进行早期准确的病情评估是当前临床医生面临的难题。

目前，ICU中普遍使用的各种危重病评分，如APACHE和SOFA评分，主要是针对疾病的一些重要症状、体征、病史、影像学和生理参数进行综合评估，并进行量化评定以达到病情庞端和预后评估，是一种较为有效的方法。但因其评分过程复杂，需要一定的时间，不仅对临床医生带来实施的困难和工作量的增加，更会延误病情，未能达到重症患者病情评估简单快速、及时的要求。寻找与重症患者病理生理过程密切相关的生化指标，作为重症患者早期病情评估的生物学标志物，是重症医学发展的迫切需要。目前，临床上已用于此的生化指标主要有PCT和CRP。尽管PCT是诊断炎症的良好指标，但对多器官功能衰竭和预后的评估仍存在较多争议，CRP更是受多种因素的影响，只能对重症患者的评估起到参考作用，两者均缺乏特异性和敏感性，临床价值欠佳，且价格昂贵，没有特别突出的优势。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒及其检测方法，旨在解决现有病情评估方法中存在的操作复杂、准确性低、周期长的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒的检测方法，该用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒的检测方法包括以下步骤：

步骤一，CHGA单克隆抗体浓度为10ng/ml，酶标板微反应孔中，每孔加入100ul包被液，4℃过夜，PBST洗涤液洗涤5次；

步骤二，加100ul/孔封闭液，4℃过夜，洗涤液洗涤5次，4℃冰箱保存；

步骤三，应用购置CHGA标准品，倍比稀释，设置空白对照，与病人血浆分别加入不同孔中，100ul/孔；依次加入酶标二抗及HRP酶标二抗后，分别加入底物显色液，终止液终止显色，应用酶标仪，测定450nm波长OD值。

进一步，在步骤一中，应用CHGA单克隆抗体，规格为100ul(1mg/ml)，抗体类型为LgG1kappa。

本发明实施例的另一目的在于提供一种用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒，该用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒包括：酶标板、封闭液容器、酶标二抗容器、底物显色液容器、终止液容器、样品稀释液容器、标准品容器、洗涤液容器；

酶标板、封闭液容器、酶标二抗容器、底物显色液容器、终止液容器、样品稀释液容器、标准品容器、洗涤液容器放置在ELISA试剂盒内，酶标板的微孔内包被有CHGA单克隆抗体的包被液。

进一步，包被液中CHGA单克隆抗体的浓度为1ug/ml。

进一步，酶标二抗的工作稀释倍数为1:2000。

本发明提供的用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒及其检测方法，通过对人血浆中的生物学标志物-CHGA，通过检测血浆水平，能够简单快速地对重症患者的病情进行早期评估，并具有良好的特异性和敏感性。本发明的试剂盒可以简单快速、准确的对入住ICU病人进行病情严重程度评估，该试剂盒预测重症患者死亡的灵敏度和特异度分别为80.0％和81.6％。应用该试剂盒可以有针对性的对疾病的发展实施有效的治疗措施以及积极的预防，并可以减轻临床工作者的工作量以及节约临床资源。

附图说明

图1是本发明实施例提供的用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒的结构示意图；

图2是本发明实施例提供的用于重症患者病情评估的ELISA试剂盒的检测方法流程图；

图3是本发明实施例提供的ROC分析入院时CGA、PCT和APACHEII预测患者生存情况；

图中：1、酶标板；2、封闭液容器；3、酶标二抗容器；4、底物显色液容器；5、终止液容器；6、样品稀释液容器；7、标准品容器；8、洗涤液容器。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。