[发明专利]一种用于黑木耳中蛋白质的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于黑木耳中蛋白质提取领域，涉及一种提取黑木耳中蛋白质方法，尤其涉及一种利用多因素试验对黑木耳蛋白质提取条件优化的方法。

背景技术

人类食用蛋白质主要有两大类，即植物蛋白和动物蛋白。由于植物蛋白具有周期短、资源丰富、产量大等优点，在食用蛋白中占70％以上，而动物蛋白则不足30％。我国是食用菌生产、出口和消费的大国，黑木耳产量占世界第一位。

黑木耳是一种药食兼用的真菌。医学上讲，黑木耳具有补血益气的功效。可用于气血亏虚、血管硬化等疾病的治疗。同时，黑木耳也是重要的保健食品，能减缓衰老，增强机体免疫功能，可预防癌症的发生。但没有确切的研究表明，黑木耳中哪些成分具有以上的医疗保健功效。

近些年来，国内外对黑木耳的研究，仅局限于对多糖的提取及其性质功效的开发。而对黑木耳中其他成分的研究较少。黑木耳中还含有10％左右的蛋白质以及钙、钾、胡萝卜素等人体所需的营养成分，对人们的身体健康有着重要的作用。通过对黑木耳蛋白质的性质进行进一步的研究，可提高大众对黑木耳的深度了解。随着对黑木耳蛋白质的研究，也增加了黑木耳的食用附加值。同时，对黑木耳产品的开发提供了一定的营养理论依据。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取黑木耳中蛋白质的方法，并对提取条件进行优化，获得最佳条件组合，从而最大限度地提高黑木耳蛋白质的提取率。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种用于黑木耳中蛋白质的提取方法，采用碱溶酸沉的方法进行提取，其步骤如下：将黑木耳粉末与水按照液料比为1∶60-100g/mL的比例进行混合，将混合液的pH值调至碱性(9.5-11.5)，在温度为30-50℃的条件下提取1.0-3.0h后，离心取上层清液，然后将清液的pH值调至2.0-4.0(即：黑木耳蛋白质等电点附近)，再离心取沉淀，即为黑木耳蛋白质粗品。

本发明研究了料液比、提取温度、提取pH值、提取时间对黑木耳蛋白质提取率的影响。在单因素试验结果的基础上，确定了各因素的水平设置范围，进行多因素试验。根据试验结果，确定最优的水平组合。

通过单因素试验得出，当提取pH值为10.5、提取时间为2.0h、料液比为1∶80g/mL、提取温度为35℃时，在各个因素下的蛋白质提取率较大。经多因素试验进一步优化，当提取pH值为10.0、提取时间为2.0h、料液比为1∶90g/mL、提取温度为40℃时，蛋白质的提取率最大。

黑木耳蛋白质含量相对较高、脂肪与热量低，开发黑木耳蛋白质新资源，对提高我国国民营养状况有着积极作用。利用本发明提供的方法提取黑木耳中的蛋白质，在操作方面比较简便，并且较易控制。同时，提取时所剩余的木耳残渣，可以做为提取木耳多糖的原料，大大提高了黑木耳的利用率。

附图说明

图1为黑木耳蛋白质等电点的测定；

图2为提取pH值对黑木耳蛋白质提取率的影响；

图3为提取时间对黑木耳蛋白质提取率的影响；

图4为料液比(m/V)对黑木耳蛋白质提取率的影响；

图5为提取温度对黑木耳蛋白质提取率的影响；

图6为不同时间、pH值对黑木耳蛋白质提取率的影响；

图7为不同温度、料液比对黑木耳蛋白质提取率的影响。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。

一、黑木耳蛋白质等电点的测定

称取20.00g木耳粉，加入1600mL蒸馏水，用0.5mol/L NaOH溶液调pH值至10.5，在搅拌条件下保温浸提2.0h后，进行离心，在8000r/min条件下离心30min，取上清液定容至1300mL。用移液管分别吸取上清液200.00mL至六个烧杯中，用0.5mol/L HCl溶液分别调至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0，冷沉24小时后分别吸取下层沉淀进行定氮。由图1可知，在pH值为3.0时，下层沉淀中蛋白质含量最多。所以，黑木耳蛋白质的等电点应在pH＝3.0这点附近。

二、黑木耳蛋白质的制备