[发明专利]bbeAMP基因、其编码的蛋白质、以bbeAMP为目的基因生产的融合蛋白及其应用

权利要求书

1.bbeAMP基因，其特征在于：bbeAMP基因的DNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示。

2.制备权利要求1所述bbeAMP基因的方法，其特征在于：所述bbeAMP基因的制备方法包括以下步骤：

(1)从已有的中国白氏文昌鱼中提取总RNA；

(2)以步骤(1)中提取的总RNA为模板，逆转录合成cDNA；

(3)以cDNA为模板、以SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8为上、下游引物，通过PCR扩增得到beeAMP基因。

3.根据权利要求2所述的制备bbeAMP基因的方法，其特征在于：所述总RNA采用Trizol试剂提取。

4.由权利要求1所述bbeAMP基因编码的蛋白质，其特征在于：所述bbeAMP基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示。

5.以权利要求1所述基因为目的基因生产重组融合蛋白的方法，其特征在于：所述生产重组融合蛋白的方法包括以下步骤：

(1)重组表达质粒的构建：以含有SEQ ID NO：1所示基因的pGEX Teasy质粒为模板、以SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10为上、下游引物或者以含有SEQ ID NO：2所示基因的pGEX Teasy质粒为模板、以SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12为上、下游引物进行PCR扩增，将PCR扩增产物克隆到表达载体pET-32a(+)上，得到重组表达质粒；

(2)重组融合蛋白的表达：将步骤(1)所得的重组表达质粒转化至大肠杆菌中，培养基因工程菌、诱导重组融合蛋白表达；

(3)纯化步骤(2)所得的重组融合蛋白；

(4)将步骤(3)所得纯化融合蛋白的洗脱液透析除盐，浓缩冻干，得到纯的重组融合蛋白。

6.根据权利要求5所述的生产重组融合蛋白的方法，其特征在于：所述重组融合蛋白表达过程中，基因工程菌在氨苄抗性2×YT培养基中培养，采用的诱导剂为IPTG。

7.根据权利要求5所述的生产重组融合蛋白的方法，其特征在于：所述纯化重组融合蛋白的方法为亲和层析法。

8.一种采用权利要求5至7中任一项所述方法制备的重组融合蛋白。

9.权利要求8所述的重组融合蛋白在制备辅助治疗感染性疾病药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的重组融合蛋白在制备辅助治疗感染性疾病药物中的应用，其特征在于：所述重组融合蛋白可与革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌结合。