[发明专利]一种基于纳米二氧化铈仿生氧化酶的微囊藻毒素比色检测方法

权利要求书

1.一种基于PNC仿生氧化酶的微囊藻毒素的检测方法，其特征在于如下步骤：

(1)向0.05～10mM PNC中依次加入浓度为1～50mg/mL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和浓度为1～50mg/mL的N-羟基琥珀酰亚胺，室温反应5～90min，活化PNC表面原有的羧基官能团；

(2)将步骤(1)获得的表面羧基活化的PNC与浓度为1～100μg/L的微囊藻毒素抗体混合，10～50℃温度下震荡1～24h，然后静置1～24h；利用截留分子量为30K纳滤膜对溶液进行分离，去除游离的PNC；向去除游离PNC后的溶液中加入浓度不大于10μg/L的微囊藻毒素，30～50℃温度条件下震荡0.5～12h，再用截留分子量为50K的纳滤膜对产物进行分离，去除未进行特异性结合的游离抗体-PNC复合物；

(3)向步骤(2)得到的产物中加入0.01～10mg/mL显色剂，反应1～60min后，加入0.1～10.0M终止液终止反应。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的显色剂为四甲基联苯胺或2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的终止液为硫酸或十二烷基硫酸钠。

4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的微囊藻毒素抗体为微囊藻毒素单克隆抗体。

5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述的微囊藻毒素抗体为微囊藻毒素单克隆抗体。