[发明专利]生血宝制剂质量检测方法及其标准指纹图谱的构建方法

说明书

技术领域

本发明属于药物质量控制技术领域，特别涉及一种生血宝制剂质量检测方法及其标准指纹图谱的构建方法。

背景技术

生血宝制剂由制何首乌、女贞子、桑椹、墨旱莲、白芍、黄芪、狗脊七味药材组成。该方具有养肝肾，益气血之功效，用于恶性肿瘤放化疗所致白细胞减少及神疲乏力，腰膝酸软，头晕耳鸣，心悸，气短，失眠、咽干，食欲不振食少等症。

贫血属祖国医学的“血虚”、“血枯”、“血证”、“虚劳”、“虚损”等范畴。《黄帝内经》记载：“精气内夺则积虚成损，积损成劳。而恶性肿瘤病机为虚、毒、瘀、痰、湿交织，停留于机体，引起气血与脏腑功能失调，发病实际上是虚实夹杂、由虚致实、由实加重虚损的复杂病理结局。《内经》的“壮人无积，虚人则有之”以及《景岳全书》的“脾胃不足及虚弱失调之人，多有积聚之病”是对恶性肿瘤病因和发病机制的高度概括。生血宝是我国著名中医药学专家的经验方，临床应用了几十余年，以益元补气、养血生津中药经现代工艺制备而成，扶正培本适合于各种贫血及恶性肿瘤的辅助治疗，特别是恶性肿瘤中晚期，针对肿瘤患者有明显的镇静、促进食欲作用。生血宝能提高干细胞分化池中干细胞的增殖能力，从而促进血细胞生成；减少外周血细胞破坏的程度，减少细胞破坏，消耗过多；调节循环池及边缘池的比例，进而调节细胞分布紊乱；科学组方，有效升高血液中白细胞和血红蛋白的含量。生血宝为纯中药制剂，毒副作用小。

现有技术中，根据生血宝中药方，已制得多种剂型的生血宝制剂，市场上生血宝制剂主要有颗粒剂、合剂等。通常的制备工艺为：将原料药材碎断后加水提取的水提物，按现有常规方法制成颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、口服液或合剂。

生血宝制剂作为中成药，其药效是多种活性成分共同作用的结果。但目前生血宝制剂现有的质量标准仅测定单一指标成份的含量，未对其他有效成分进行监测，存在一定局限性，不能全面反映生血宝制剂的质量水平。针对生血宝制剂的质量检测方法公开很少，如中国专利03124519.6(公开号CN1552378A)、94110841.4(公开号CN1106287A)、200410047024.9(公开号CN1785260A)、200410092412.9(公开号CN1660290A)、200910021150.X(公开号CN101804103A)与201310373355.0(公开号CN103405522A)均未涉及其质量检测方法；《临床合理用药》2012年3月第5卷第3C期《HPLC法测定生血宝合剂中齐墩果酸的含量分析》记载了一种测定生血宝合剂中齐墩果酸的含量的HPLC方法；《安徽中医学报》2013年10月第32卷第5期《生血宝颗粒中何首乌苷的含量测定》记载了一种测定生血宝颗粒剂中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量的HPLC方法。现有技术中，尚无较全面的质量控制方法反映现有中药材、中间体及成品的质量状况，也无法对生产过程及产品质量有效控制，不能较好地保证其临床疗效。因此，建立生血宝其制剂的指纹图谱检测方法和标准指纹图谱具有非常重要的意义。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种生血宝制剂质量检测方法及其标准指纹图谱的构建方法。

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

1、生血宝制剂质量检测方法，其特征在于，所述方法包括：

第一，溶液的制备：

(1)对照品溶液的制备：用体积百分比浓度为50～100％的甲醇将芍药苷配制成每1mL含0.02～0.06mg芍药苷的对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：取液体剂型的生血宝制剂1.0～5.0ml或固体剂型的生血宝制剂0.6～3.0g，溶于25～125mL体积百分比浓度为0～100％的甲醇或体积百分比浓度为0～50％的乙醇中，混匀，配制成供试品溶液；

第二，测定及分析：

高效液相色谱分析：分别精密吸取等量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，记录60min的色谱图，即得生血宝制剂指纹图谱；

所述高效液相色谱分析中，色谱柱为C₁₈反相色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为质量百分比浓度为0.1～0.2％的磷酸溶液；采用梯度洗脱方式：

柱温25℃～40℃；流速0.8ml/min～1.2ml/min；检测波长为200～230nm；

将生血宝制剂指纹图谱与生血宝制剂标准指纹图谱相比对，鉴别生血宝制剂有效成分以及是否添加了其它成分；

所述生血宝制剂标准指纹图谱按照如下步骤构建：