[发明专利]一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法。

背景技术

绿原酸(Chlorogenic acid)是由咖啡酸(Caffeic acid)与奎尼酸(Quinic acid)组成的缩酚酸，异名咖啡单宁酸，化学名：3-O-咖啡酰奎尼酸(3-O-Caffeoyl quinic acid)，分子式：C₁₆H₁₈O₉，分子量：354.30，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。它是许多中药材的有效成分之一，又是某些成药的质量指标。绿原酸应用非常广泛，主要为医药、日用化工和食品等行业。绿原酸在各类植物中的存在相当普遍，但含量较高的植物并不多见。近年的研究表明，杜仲叶绿原酸含量丰富，可达1％～5％。我国杜仲林种植广泛，每年可产杜仲叶几百万吨，这为提取绿原酸提供了充足的原料基础。

目前从杜仲叶中提取绿原酸的报道较多，绿原酸的提取方法主要有有机溶剂提取法、物理强化提取法、超高压提取法、匀浆提取法等。如：钱骅，等，杜仲叶绿原酸的提取分离，中国野生植物资源，第20卷第4期，它是将杜仲叶干粉用70％乙醇(pH＝2.5)，90℃提取3次,每次提取半小时,料液比分别为1:12,1:10,1:8。提取液浓缩至一定体积，预处理后上样。同时比较了17种大孔吸附树脂对杜仲叶绿原酸的吸附、洗脱性能和吸附动力学特性；筛选试验表明NKA-9是一种性能优良的吸附剂。王茜，等，杜仲叶中绿原酸提取分离工艺条件的研究，离子交换与吸附，2008，24(1):73～80，对杜仲叶绿原酸的提取分离进行研究。探讨了水以及不同浓度乙醇﹑甲醇和丙酮水溶液作为提取溶剂对绿原酸得率的影响，采用正交实验方法对影响绿原酸提取率的主要因素进行分析，并采用大孔树脂对其分离。结果表明，50℃水提绿原酸得率比较高，其得率为1.06％，从而确定水作为绿原酸提取溶剂；水提杜仲叶绿原酸的最佳工艺条件为：温度60℃，料液比1:16,pH4，提取时间3h，所筛选的GC-I树脂是吸附分离绿原酸的最佳吸附剂，吸附最佳pH值为3，吸附流速为3BV/h；本实验条件下得到粗产品纯度为30.88％，收率为76.51％。苗磊，杜仲叶中绿原酸的提取和纯化，北京化工大学，2011年6月6日，公开了首先用水对杜仲叶粉末进行绿原酸的提取,将提取液通过NKA-9大孔树脂进行纯化，蒸去溶剂得绿原酸产品；提取残渣烘干后用碱液浸提分解细胞壁，然后烘干用石油醚热回流提取杜仲胶，提取液采用冻胶法得粗胶，丙酮清洗得乳白色精胶，即为杜仲胶产品。李光锋，杜仲叶中绿原酸的提取、纯化研究，湖南农业大学，2006年10月，2.对绿原酸的稳定性进行了研究,结果表明绿原酸在60℃以内,4-6h较稳定。在碱性条件下易分解,在pH＝3的酸性条件下最稳定,绿原酸在强光照射下不稳定，因此在绿原酸的提取分离中应尽量保持在酸性、避光条件下进行。绿原酸的提取溶剂和提取方法,结果发现提取溶剂水和加热提取较好。之后采用正交试验考察了温度、时间、固液比和颗粒度4因素,对加热提取工艺进行了优化,结果表明:温度65℃,提取时间60min,固液比1:25,颗粒度为40目时较好。绿原酸的柱层析优化条件的研究。通过对吸附剂、洗脱剂等进行比较研究，结果表明以KLFC-150,树脂为吸附剂、以乙醇为洗脱剂为最优条件，以此方法分离绿原酸，纯度和收率都较高，纯度达到56.67％，收率为78.37％。

发明内容

本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法。

本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法，它包括如下步骤：

a、称取杜仲叶；

b、水提取：加水提取，提取温度40℃-80℃，提取时间0.5h-4.0h，提取次数1-3次，每次水用量为药材质量比的6-14倍，pH值为2-7，浸提或动态提取；

c、预处理：加入澄清剂，添加量为药材质量的0.2％-1.0％，沉降温度40℃-80℃，沉降时间0.5h-24h；

d、过滤：c步骤的预处理液通过孔径为50μm-200μm的滤膜或滤芯过滤；

e、上大孔吸附树脂：d步骤的过滤液通过非极性或弱极大孔吸附树脂，树脂柱径高比1:4-1:10；上样流速2.0-8.0BV/H，吸附量为药材质量与柱体积比1:1-1:5；水洗用量为0.5-2.0BV，水洗流速为2.0-8.0BV/H；洗脱溶剂种类为甲醇或乙醇，其浓度为10-80％，洗脱用量为1.0-6.0BV，洗脱流速2.0-8.0BV/H；