[发明专利]一种测定奶制品中三聚氰胺和/或二聚氰胺含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析检测领域，具体涉及到一种测定奶制品中三聚氰胺和/或二聚氰胺含量的方法。

背景技术

三聚氰胺(含氮量66％)与蛋白质(平均含氮量16％)相比含有更高比例的氮原子，因此被一些造假者利用，添加在奶制品中以造成产品中蛋白质含量较高的假象。然而，三聚氰胺能导致肾脏中的不溶性三聚氰胺—三聚氰酸结合晶体的形成，从而导致肾功能衰竭。2008年9月，中国发生了骇人听闻的含三聚氰胺的婴幼儿问题奶粉事件，被三聚氰胺污染的奶粉导致上万的婴幼儿患肾结石病住院，甚至有数名死亡。为了确保食品供应三聚氰胺不受掺假，一些国家和组织已采取积极措施，例如增加进口乳源配料和成品的取样和测试。2008年11月，美国FDA将婴幼儿配方奶粉中的三聚氰胺的限量值设定在1mg/kg。2008年12月，世卫组织专家会议规定了婴儿配方奶粉中的三聚氰胺含量为1.0mg/kg。与此同时，中国发布了测定原料乳与乳制品中三聚氰胺的三项国家标准方法：高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法、气相色谱-质谱/质谱法，检出限分别为2mg/kg、0.01mg/kg和0.05mg/kg[0.005mg/kg]，及一项原料奶和液态奶中三聚氰胺的快速测定的国家标准方法,检出限为0.05mg/kg。2011年，我国公布三聚氰胺在食品中的限量值规定：婴儿配方食品中三聚氰胺的限量值为1mg/kg，其他普通食品中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg(卫生部公告2011年第10号)。2012年7月，食品法典委员会第35届会议审查制定了婴儿配方奶粉中的三聚氰胺限量为0.15mg/kg。

2013年1月，享誉全球的新西兰牛奶及奶制品被检测出含有有毒物质二聚氰胺，乳制品的安全再次引发了消费者的担忧。本次新西兰奶粉二聚氰胺事件，据悉为由于少数牧场使用了含二聚氰胺的化肥，促进牧草的生长，同时牛、羊吃这种草可以减少二氧化氮的排放，减少硝酸盐从土壤中渗入河水和溪流，起到保护环境的效果。由于牧草含有二聚氰胺，导致牛奶中二聚氰胺的残留。目前，与二聚氰胺相关的现行标准有两条：HG/T3264-1999《工业双氰胺》和CNS14682-2002《肥料检验法(双氰胺态氮之测定)》。但是还没有对食品或者奶制品中的双氰胺的检测的相关标准，仅有一些关于奶制品中的双氰胺的测定方法，如高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)和液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)的研究报道。

以上提到的用于三聚氰胺和二聚氰胺检测的方法均使用了色谱技术或色谱-质谱联用技术，需要昂贵的、特殊的仪器，不能适用于一般实验室及现场的快速、简便、廉价检测的需求。此外，由于奶制品中存在复杂的基质，上述方法通常耗时或需要用有机溶剂对样品进行预处理，如萃取。

紫外-可见吸收光谱法是一种简便、快速、准确并广泛应用于实验室和工厂的定性和定量分析方法。紫外可见吸收光谱测定的是溶液样品，而不是粉末样品。因此，可以获得更准确和重复性更高的结果。但是，如果将紫外-可见吸收光谱法直接用于测定像奶制品这样的复杂样品，它会受到来自基质的严重干扰。因此，以往常需要费时、繁重的化学分离。化学计量学可以使光谱技术在样品不经过复杂的化学分离的条件下进行分析，它已被广泛地用于很多领域。但到目前为止，利用紫外-可见吸收光谱结合化学计量学同时测定三聚氰胺和二聚氰胺的含量还未见报道。

发明内容

本发明一种测定奶制品中三聚氰胺和/或二聚氰胺含量的方法，首先利用紫外可见分光光度计采集校正集奶样品溶液的原始光谱图，使用一些常见的光谱预处理方法对原始光谱进行预处理，再通过一些化学计量学方法进行模型回归，最后通过模型预测未知奶样品中的三聚氰胺和二聚氰胺含量。在此基础上，针对现有对三聚氰胺和二聚氰胺的检测方法存在的耗时长、操作繁琐、成本昂贵等问题，结合在盐酸中使用硅胶沉淀离心除去样品基质的简单前处理，建立了一种简单、快速、灵敏、准确检测奶制品中三聚氰胺和二聚氰胺的方法。

在没有其他特别说明的情况下，对本申请相关文件中出现的名词做出如下约定：

化学计量学方法：化学计量学是一门应用数学、统计学和计算机技术的原理和方法来处理化学数据的学问，它是分析化学的三级学科，化学计量学可以优化化学量测过程，并从化学量测数据中最大限度地提取有用的化学信息，与其他以理论计算的化学分支如量子化学不同的是，化学计量学是以化学实验数据为基础的学科，其一切理论和方法都是建立在试验数据的基础上的。具体到本申请中，涉及到偏最小二乘法、支持向量机法和最小二乘支持向量法。

校正集：化学计量学中用于模型建立的数据集。