[发明专利]沙门氏菌检测方法及检测用培养基有效
| 申请号: | 201410167738.7 | 申请日: | 2014-04-24 |
| 公开(公告)号: | CN103898191A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
| 发明(设计)人: | 刘辉;陈玉贞;胡光春;刘岚铮;张济;李健;时玉雯 | 申请(专利权)人: | 济南市疾病预防控制中心 |
| 主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04 |
| 代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 彭成 |
| 地址: | 250021 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 沙门氏菌 检测 方法 培养基 | ||
1.一种沙门氏菌检测方法,其特征在于:步骤如下:
(一)填装毛细管:以内径为0.5~5mm、长度3~10cm的直管毛细管为容器,装载MSTT培养基或MSRV培养基;
所述MSTT培养基的组成为:每1L培养基中,含有以下组分:5.0~10.0g蛋白胨,0~5.0g牛肉膏,0~3.0g氯化钠,1.0~5.0g胆盐,30.0~50.0g硫代硫酸钠,9~10mg煌绿,4.0~5.0g碘,5.0~6.0g碘化钾,2.5~3.0g琼脂,0或20~40mg新生霉素,余量为水;
(二)检测:进行以下两种操作之一,或以下两种操作都进行:
(1)将上述填装培养基后的毛细管的一端接入液态待检样本、待检样本的稀释液、含有待检样本的预增菌液或含有待检样本的增菌液中,另一端密封或接入培养基中,该培养基与毛细管内填装的培养基相同;若毛细管中接入的培养基为MSTT培养基,则培养16<t≤48h后,进行观察;若毛细管中接入的培养基为MSRV培养基,则培养30<t≤72h后,进行观察;
(2)将液态待检样本、待检样本的稀释液、含有待检样本的预增菌液或含有待检样本的增菌液接种到四硫磺酸钠煌绿肉汤、Muller-Kauffmann四硫磺酸钠新生霉素肉汤、Rappaport-Vassiladis胰蛋白胨肉汤、Rappaport-Vassiladis肉汤或亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,得接种液;然后将上述填装培养基后的毛细管的一端接入接种液中,另一端密封或接入培养基中,该培养基与毛细管内填装的培养基相同;若毛细管中接入的培养基为MSTT培养基,则培养16<t≤48h后,进行观察;若毛细管中接入的培养基为MSRV培养基,则培养30<t≤72h后,进行观察;
所述观察是指:观察毛细管内、毛细管密封端、毛细管接入培养基的一端或毛细管所接入的培养基,观察是否有晕环,有晕环者为疑似阳性结果,表明待检样本中可能含有沙门氏菌;无晕环者为阴性结果,表明待检样本中不含有沙门氏菌。
2.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:还包括以下步骤:
(三)鉴定:对上述检测结果为疑似阳性结果的待检样本进行鉴定,以进一步确定待检样本中是否含有沙门氏菌。
3.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:所述毛细管选择选内径1mm、长度5cm的直管毛细管。
4.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:所述毛细管的材质为玻璃、透明塑料或透明合成树脂中的任一种。
5.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:所述密封是指用气密性橡胶或气密性硅胶帽直接密封。
6.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:所述接入毛细管的培养基盛放在1~10mL容量的管制瓶或1~10mL容量的透明塑料瓶中,管制瓶或透明塑料瓶用气密性橡胶塞或气密性硅胶塞密封,毛细管穿过该硅胶塞或橡胶塞。
7.根据权利要求1所述的沙门氏菌检测方法,其特征在于:所述MSTT培养基的组成为:每1L培养基中,含有以下组分:10.0g蛋白胨,5.0g牛肉膏,3.0g氯化钠,5.0g胆盐,50.0g硫代硫酸钠,10mg煌绿,5.0g碘,6.0g碘化钾,2.7g琼脂,40mg新生霉素,余量为蒸馏水。
8.一种用于沙门氏菌检测的培养基——MSTT培养基,其特征在于:其组成为:1L培养基中,含有以下组分:5.0~10.0g蛋白胨,0~5.0g牛肉膏,0~3.0g氯化钠,1.0~5.0g胆盐,30.0~50.0g硫代硫酸钠,9~10mg煌绿,4.0~5.0g碘,5.0~6.0g碘化钾,2.5~3.0g琼脂,0或20~40mg新生霉素,余量为水。
9.根据权利要求8所述的MSTT培养基,其特征在于:每1L培养基中,含有以下组分:10.0g蛋白胨,5.0g牛肉膏,3.0g氯化钠,5.0g胆盐,50.0g硫代硫酸钠,10mg煌绿,5.0g碘,6.0g碘化钾,2.7g琼脂,40mg新生霉素,余量为蒸馏水。
10.权利要求8或9所述的MSTT培养基在检测沙门氏菌中的应用。
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