[发明专利]用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物及其用途和分析方法有效

专利信息
申请号: 201410166679.1 申请日: 2014-04-23
公开(公告)号: CN103981257A 公开(公告)日: 2014-08-13
发明(设计)人: 胡好远;陈伟;方磊;刘佳璐;贺张 申请(专利权)人: 安徽师范大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 代理人: 朱圣荣
地址: 241000 安徽省*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 用于 金小蜂 多样性 分析 卫星 引物 及其 用途 方法
【权利要求书】:

1.一种用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物,其特征在于,其核苷酸序列为:BL1F:GGGGTGTGTGAGATAACGC,     BL1R:GGAGGCGAAATTTGTTGCT;

BL2F:CGTCCATTGGAGAGACATCG,     BL2R:TGTATATCGCGCACGGACC;

BL3F:AGCCATCGTGATTTCTCCG,      BL3R:CGATACACGCGCGTCTATTC;

BL4F:AGCGAGCAAAGGTAGTGGTG,     BL4R:CACCGACCATCGTCATTATCT;

BL5F:CGACGTAAAAAGTCATTACGAGTC, BL5R:ATTTCCAATTTGGCACGGTC;

BL6F:GCATCGTCTCCTGAACAATC,     BL6R:GATACCACTCGCACGAGGT;

BL7F:GCGAAGGTGAAACGGAGAA,      BL7R:ATAGGCATACGTGCGACAGC;

BL8F:CGTTTCTGTTTGTCATCGACAG,   BL8R:AGATGGTTCGGCGATAAAGA;

BL9F:TCAGCATTAAATGGCGTCG,      BL9R:CACTTGAGCGCGTTCAATC;

BL10F:GTCTGCCTCGTCTCGGATT,     BL10R:AGCGAGCGAGTGAGAGAGTAAG。

2.如权利要求1所述的用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物,其特征在于,引物BL1重复基序为(TC)12,溶解温度Tm为55.5℃,扩增片段大小为162-174;

引物BL2重复基序为(CT)11,溶解温度Tm为55.7℃,扩增片段大小为156-169;

引物BL3重复基序为(TC)13,溶解温度Tm为55.4℃,扩增片段大小为166-182;

引物BL4重复基序为(AG)10TA(AG)7,溶解温度Tm为51.7℃,扩增片段大小为211-215;

引物BL5重复基序为(AG)8,溶解温度Tm为52.9℃,扩增片段大小为130-149;

引物BL6重复基序为(AG)11,溶解温度Tm为51.8℃,扩增片段大小为128-174;

引物BL7重复基序为(AG)9,溶解温度Tm为53.7℃,扩增片段大小为157-167;

引物BL8重复基序为(AG)10,溶解温度Tm为53.0℃,扩增片段大小为155-177;

引物BL9重复基序为(GA)11,溶解温度Tm为54.4℃,扩增片段大小为172-184;

引物BL10重复基序为(GA)11,溶解温度Tm为55.7℃,扩增片段大小为282-292。

3.如权利要求1和2所述用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物的用途,其特征在于,用于蝇蛹金小蜂群体遗传结构分析。

4.如权利要求3所述用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物的用途的分析方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)基因组DNA提取;

(2)TP-M13-SSR分子标记检测;

(3)进行遗传结构分析。

5.如权利要求4所述用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物的用途的分析方法,其特征在于,步骤(1)中具体包括如下步骤:

1)从样本中取出个体;

2)容器中研磨成粉末,加入Buffer Digestion,震荡混匀;

3)水浴至细胞完全裂;

4)加入Buffer PA,充分颠倒混匀;

5)离心,将上清液转移到新的容器;

6)加入等体积的异丙醇,充分混匀,室温放置;

7)离心,弃上清;

8)加入乙醇,颠倒漂洗,离心弃上清;

9)开盖室温倒置至残留的乙醇完全挥发;

10)得到的DNA用TE Buffer溶解;

11)收集DNA,保存。

6.如权利要求4或5所述用于蝇蛹金小蜂多样性分析的微卫星引物的用途的分析方法,其特征在于,步骤(1)中采用动物基因组DNA抽提试剂盒进行DNA提取。

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