[发明专利]一种桑树中脱氧野尻霉素的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种桑树成分的提取方法，尤其涉及桑树中脱氧野尻霉素的提取纯化方法。

背景技术

桑叶作为药食两用植物含有多种有效成分，具有良好的降血糖、降血脂、减肥等作用。近年来，国内外学者对桑叶进行了深入研究，证明桑叶中的多糖、黄酮及生物碱类均具有良好的降血糖作用。陈福君等报道了自桑叶中提取的桑叶总多糖(TPM)对四氧嗯陡糖尿病小鼠有显著降血糖作用;桑叶中的生物碱可显著降低血糖水平，其中 DNJ降血糖作用尤其明显。1-脱氧野夙霉素(DNJ)，化学名称为3,4,5-三羟基-2羟甲基四氢吡啶，是桑叶中特有的天然活性成分，具有高效的药理活性，可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病。

CN102276515B(2013-5-8)公开了一种脱氧野尻霉素的提取方法，将桑原料用酸水溶液浸泡提取1-3次;提取液上阳离了交换树脂吸附，水洗后，用氨水洗脱;反渗透预浓缩洗脱液后，回收氨，中问体溶于亲水性溶剂，催化转化，溶液上凝胶层析柱，亲水性溶剂洗脱;回收溶剂后，溶于混合溶剂，上层析柱，混合溶剂洗脱;回收混合溶剂，即得脱氧野属霉素纯品。然而该方法的提取率和分离效果仍然有待改进。

发明内容

本发明的目的是提供提取率高、分离效果好的桑树中脱氧野尻霉素的提取纯化方法。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种桑树中脱氧野尻霉素的提取纯化方法，它包括以下步骤：

（1） 水提：取桑树叶片晒干，然后加去离子水，恒温沸腾提取，过滤收集滤液，滤渣加去离子水再提取，合并滤液，加入三氯乙酸离心，得第一上清液；

（2） 上柱：将所述第一上清液用反向柱色谱进行纯化，得到含有脱氧野尻霉素的液体；

（3） 醇沉取上清：在上柱后所得的含有脱氧野尻霉素的液体中先加入含醇质量55-65%的乙醇搅拌3-8min，然后再加入含醇质量70-80%乙醇搅拌3-5min，得第二上清液；

（4） 浓缩：将所述第二上清液浓缩后得浓缩液；

（5） 微波真空干燥：将所述浓缩液微波真空干燥得到含有脱氧野尻霉素的粉末产品。

作为优选，所述步骤（1）水提具体是取桑树叶片在阳光下暴晒晒干，然后加8-12倍晒干后桑树叶片重量的去离子水，置于罐组式逆流提取设备中进行包括至少第一循环、第二循环和第三循环的三次循环提取，所述灌组为每组三个提取罐串联合用，逆流提取流速为25-35min/罐，提取温度为80-110℃；

所述第一循环是从第一提取罐开始逆流提取：具体是将晒干后桑树叶片和8-12倍晒干后桑树叶片重量的去离子水分别按等份加入第一提取罐、第二提取罐和第三提取罐中；第一提取罐第一次提取的药液过滤后放入储液罐备用，第一提取罐的第二次提取和第一提取罐的第三次提取分别加入4-5倍蒸馏水；然后将第一提取罐的第二提取液作为第二提取罐的第一次提取的溶剂，第二提取罐的第一提取液过滤备用；将第一提取罐的第三提取液作为第二提取罐的第二次提取的溶剂，第二提取罐的第二次提取中加入4-5倍蒸馏水；第二提取罐的第二提取液作为第三提取罐的第一次提取的溶剂；

所述第二循环是从第二提取罐开始逆流提取：具体是合并第一循环中的第一提取罐、第二提取罐和第三提取罐中的第一提取液至包含有第一循环第二次提取后的桑树叶渣的第二提取罐中，然后加入4-5倍蒸馏水进行第一次提取；将第二提取罐的第一提取液作为包含有第一循环第一次提取后的桑树叶渣的第三提取罐中，然后加入4-5倍蒸馏水进行第一次提取；然后将第三提取罐的第一提取液作为包含有第一循环第三次提取后的桑树叶渣的第一提取罐中进行第一次提取；

所述第三循环是从第三提取罐开始逆流提取：具体是合并第二循环中的第一提取罐、第二提取罐和第三提取罐中的第一提取液至包含有第二循环第一次提取后的桑树叶渣的第三提取罐中，然后加入4-5倍水进行第一次提取；将第三提取罐的第一提取液作为包含有第二循环第一次提取后的桑树叶渣的第一提取罐中，然后加入4-5倍蒸馏水进行第一次提取；然后将第一提取罐的第一提取液作为包含有第二循环第一次提取后的桑树渣的第二提取罐中进行第一次提取；

合并第三循环中的第一提取罐、第二提取罐和第三提取罐中的第一提取液并过滤收集滤液，加入三氯乙酸离心，得第一上清液。

更优选地，所述三次循环提取中，每8小时断开第一个提取罐卸料，重新投料后进行依次串联。