[发明专利]一种用于羊传染性脓疱病毒分离培养和增殖的细胞系及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201410161991.1 | 申请日： | 2014-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN103952377A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 刘湘涛;王光祥;尚佑军;张志东;王艳华;黎摄儿;田宏;吴锦艳;陈妍;逯忠新 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N5/071;A61K39/275;A61P31/20;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;韩小雷 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 传染性 病毒 分离 培养 增殖 细胞系 及其 制备 方法 应用 | ||
1.新生牛睾丸支持细胞系在制备用于羊传染性脓疱病毒分离培养和增殖的试剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的新生牛睾丸支持细胞系为新生牛睾丸支持细胞系NBSC，该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C201438。
3.新生牛睾丸支持细胞系在制备羊传染性脓疱病疫苗中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的新生牛睾丸支持细胞系为新生牛睾丸支持细胞系NBSC，该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C201438。
5.一种羊传染性脓疱病毒的培养方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）选生长良好布满单层的新生牛睾丸支持细胞系，倾去营养液，按原营养液体积的5-15%接种羊传染性脓疱病毒液，吸附10-30分钟后加DMEM维持液，调PH至7.0～7.2，加青霉素、链霉素各100单位/ml，于37℃、5%CO2浓度培养箱中进行培养；
（2）培养40～72h，细胞病变（CPE）达到75%以上时收获病毒，置-20℃冰箱反复冻融两次，然后进行无菌检验、支原体检验、外源病毒检验合格后，用Reed-Muench法测定病毒毒价，即可得到羊传染性脓疱细胞病毒液。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于所述的新生牛睾丸支持细胞系为新生牛睾丸支持细胞系NBSC，该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C201438。
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