[发明专利]鸭源多种致病菌的多重PCR检测引物组及其试剂盒有效
申请号: | 201410161746.0 | 申请日: | 2014-04-21 |
公开(公告)号: | CN103937892A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 曾振灵;仇珍珍;蒋红霞;瞿颖;李亚菲;曹长福 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多种 致病菌 多重 pcr 检测 引物 及其 试剂盒 | ||
1.一种用于检测4种鸭源致病菌的多重PCR检测引物组,其特征在于,所述引物组包含4对引物:RA rpoB-P1和RA rpoB-P2;E.coli phoA-P1和E.coli phoA-P2;Salm invA-P1和Salm invA-P2;Strep 16srRNA-P1和Strep 16srRNA-P2;引物序列如SEQ ID NO:1~8所示;所述4种鸭源致病菌为鸭疫里氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌和链球菌。
2.一种用于检测4种鸭源致病菌的多重PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有权利要求1所述引物组,所述4种鸭源致病菌为鸭疫里氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌和链球菌。
3.根据权利要求2所述多重PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中各引物对的上游引物和下游引物的浓度分别为10 μM,所述试剂盒还含有10×PCR反应缓冲液、DNA聚合酶和dNTP。
4.根据权利要求2所述多重PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的多重PCR反应体系为:10×PCR反应缓冲液 5 μL、DNA聚合酶 0.3 μL、dNTP 4 μL、rpoB-P1 0.5 μL、rpoB-P2 0.5 μL、phoA-P1 0.5 μL、phoA-P2 0.5 μL、16SrRNA-P1 0.5 μL、16SrRNA-P2 0.5 μL、invA-P1 0.5 μL、invA-P2 0.5 μL,DNA模板1 μL,用无菌的超纯水补齐到25μL。
5.根据权利要求2所述多重PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的多重PCR的反应条件为:95℃预变性5min,94℃35s,56℃35s,72℃45s共运行35个循环,最后72℃延伸10min。
6.权利要求2至5任一项所述多重PCR检测试剂盒在检测鸭疫致病菌中的应用。
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