[发明专利]一种水蛭素磷脂复合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合物及其制备方法与应用，尤其是一种水蛭素复合物及其制备方法与应用。

背景技术

水蛭素是从水蛭头部提取的一种单链环肽化合物，分子量为7000道尔顿，由65个氨基酸残基组成。水蛭素是水蛭中含有的一种重要有效成分，具有很强的抗凝血和抗血栓活性。随着分子生物学和基因工程技术的发展，与天然水蛭素结构和药理活性基本相同的重组水蛭素已经被成功合成，推动了水蛭素的临床应用。例如，在治疗糖尿病及并发症方面，水蛭素有改善2型糖尿病胰岛素抵抗的作用（浙江中医学院学报，2005年第29卷第4期），水蛭素可降低尿中微量白蛋白、改善高凝状况，对糖尿病肾病和高血压肾病患者的肾脏有较好的保护作用（临床合理用药，2010年第3卷第22期）。

水蛭素为水溶性生物大分子，脂溶性差，进入体内后主要分布于细胞外液,不易透过血脑屏障，易降解，不与血浆蛋白结合（中草药，2003年第34卷第8期）。这些特性使水蛭素较难通过胃肠黏膜有效吸收，因此其给药途径主要为注射给药。但水蛭素在血浆中的消除半衰期不到1小时，这对需要长期抗凝的患者带来很大不便。采用脂质体包封水蛭素是一种改善水蛭素生物利用度的有效手段（中国中药杂志，2007年第32卷第9期），但由于包封率、粒径等问题，目前水蛭素脂质体多用于黏膜给药途径。因此，研发一种确有疗效、可注射给药、药效持久的水蛭素药物组合物成为本领域技术人员不懈追求的目标。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种水蛭素磷脂复合物。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述水蛭素磷脂复合物的制备方法。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述水蛭素磷脂复合物的应用。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种水蛭素磷脂复合物，由水蛭素和磷脂组成，所述水蛭素和磷脂的摩尔比为1:1（以平均分子量计），所述水蛭素磷脂复合物是由下述方法制备得到的：

（1）将水蛭素溶于乙醇中，得到第一溶液，其中，所述水蛭素和乙醇的用量比为1:5-30（g/mL）；

（2）将磷脂以非质子溶剂溶解，得到第二溶液，其中，所述磷脂和非质子溶剂的用量比为1:10-200（g/mL），所述非质子溶剂为四氢呋喃、三氯甲烷、甲醇、乙醚或二氧六环中任一种、或几种的任意浓度的任意组合：

（3）搅拌条件下将第一溶液与第二溶液充分混合，除去有机溶剂，加入甘露醇水溶液，溶解，过滤，冷冻干燥即得。

上述水蛭素磷脂复合物，所述水蛭素可以是以各种方法分离提取得到的天然水蛭素，也可以是以生物技术合成的重组水蛭素。

上述水蛭素磷脂复合物，所述磷脂可以是供注射用的大豆磷脂，也可以是供注射用的蛋黄卵磷脂。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物，所述乙醇为体积浓度70-90%（v/v）的乙醇水溶液。

一种水蛭素磷脂复合物的制备方法，具体步骤如下：

（1）将水蛭素溶于乙醇中，得到第一溶液，其中，所述水蛭素和乙醇的用量比为1:5-30（g/mL）；

（2）将磷脂以非质子溶剂溶解，得到第二溶液，其中，所述磷脂和非质子溶剂的用量比为1:10-200（g/mL），所述非质子溶剂为四氢呋喃、三氯甲烷、甲醇、乙醚或二氧六环中任一种、或几种的任意浓度的任意组合：

（3）搅拌条件下将第一溶液与第二溶液充分混合，其中，所述水蛭素和磷脂的摩尔比为1:1（以平均分子量计），除去有机溶剂，加入甘露醇水溶液，溶解，过滤，冷冻干燥即得。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（1）中乙醇的体积浓度为70-90%（v/v）。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（3）中第一溶液与第二溶液充分混合的反应温度为室温至水蛭素溶液和磷脂溶液的混合液的沸腾温度，以实现加热回流。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（3）中第一溶液与第二溶液充分混合的反应时间为5min-2h。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（3）中除去有机溶剂的方法为减压蒸馏法或常压蒸馏法。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（3）中甘露醇水溶液的用量(以mL计)为水蛭素和磷脂质量总和(以g计)值的5倍-20倍。

优选的，上述水蛭素磷脂复合物的制备方法，所述步骤（3）中甘露醇水溶液中甘露醇的浓度为1-20%（g/mL）。