[发明专利]一种用于直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法有效
| 申请号： | 201410154389.5 | 申请日： | 2014-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN103954749A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 孙远明;刘凤银;徐振林;沈玉栋;雷红涛;王弘;杨金易;肖治理 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53;C07K14/795;C07K14/77;C07K14/765;C07K16/44 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 直接 检测 呋喃 代谢物 amoz 快速 免疫 方法 | ||
1.一种直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.将具有式（Ⅲ）所示分子结构的AMOZ人工抗原作为免疫原免疫动物制备AMOZ的多克隆抗体；
S2将具有式（Ⅳ）所示分子结构的AMOZ人工抗原作为包被原包被在微孔板上，将步骤S1制备得到的AMOZ的多克隆抗体加入微孔板中；
S3.采用竞争ELISA测定待测样品中AMOZ的含量；
。
2.根据权利要求1所述快速免疫检测方法，其特征在于，式（Ⅲ）所示分子结构的AMOZ人工抗原是由式（Ⅰ）所示分子结构的AMOZ半抗原与载体蛋白偶联得到，式（Ⅳ）所示分子结构的AMOZ人工抗原是由式（Ⅱ）所示分子结构的包被半抗原与载体蛋白偶联得到；。
3.根据权利要求2所述快速免疫检测方法，其特征在于，式（Ⅰ）所示分子结构的AMOZ半抗原的制备方法，包括如下步骤：将AMOZ和乙醛酸分别溶于无水乙醇中，搅拌过程中将乙醛酸的乙醇溶液滴加到AMOZ的乙醇溶液中，AMOZ和乙醛酸的摩尔比为1：1.2；室温搅拌过夜，反应结束，真空抽滤，依次用乙醇和乙醚洗涤2次，取沉淀、干燥获得式（Ⅰ）所示AMOZ半抗原。
4.根据权利要求2所述快速免疫检测方法，其特征在于，式（Ⅱ）所示分子结构的包被半抗原的制备方法，包括如下步骤：将AMOZ和顺丁烯二酸酐分别溶于无水乙醇中，搅拌过程中将顺丁烯二酸酐的乙醇溶液滴加到AMOZ的乙醇溶液中，AMOZ和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1：1.2；室温搅拌过夜，反应结束，真空抽滤，依次用乙醇和乙醚洗涤2次，取沉淀、干燥获得式（Ⅱ）所示包被半抗原。
5.根据权利要求2所述快速免疫检测方法，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清蛋白、匙孔血蓝蛋白或卵清蛋白。
6.根据权利要求1所述快速免疫检测方法，其特征在于，S1所述AMOZ的多克隆抗体的效价为1：64000，最低检测限为0.852 ng/mL，半抑制浓度为15.26 ng/mL。
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