[发明专利]一种百子莲高频再生体系建立的方法

说明书

技术领域

本发明属于组织培养领域，涉及一种百子莲高频再生体系建立的方法。

背景技术

百子莲（Agapanthus praecox ssp.）是原产于南非的多年生根茎类花卉，又名非洲百合、百子兰、蓝花君子兰、紫穗兰等，素有“爱情之花”的美誉，目前研究者对其分类地位还不统一，曾被归为百合科(Liliaceae)、葱科(Alliaceae)或石蒜科(Amaryllidaceae)的亚科(Agapanthoideae),近期还有学者将其单独归为一科--非洲百合科(Agapanthceae)。百子莲植株秀丽，叶色浓绿，花茎挺立，花型优雅，花色淡雅，不但是非常理想的地被和花境植物材料，而且也是很好的鲜切花材料，同时也可用作药用成分的提取，目前已成功应用在上海世博绿化景观，这必将在上海及周边城市绿化景观上起到示范效应，市场对百子莲需求将逐步加大，开发前景广阔。我国于2000年对百子莲进行引种栽培，栽培研究发现，百子莲多数不结果或种子不能萌芽或分化严重，而且播种繁殖需要3-6年的精心养护才能正常开花；分株繁殖，则繁殖速度缓慢、繁殖系数低，且小苗生长不快；而组织培养的方法则可大大加快百子莲的繁殖速度，缩短繁殖的周期。百子莲属植物引入我国时间不长，对其组培技术的报道比较少见，仅见康玲以百子莲的根茎部和叶片为外植体进行组培研究，但未获得生根。而且用现有的方法生产百子莲种苗产量不足，难以满足市场需求的现状。

发明内容

本发明的目的在提供一种百子莲高频再生体系建立的方法，解决了现有的方法生产百子莲种苗产量不足，难以满足市场需求的现状的问题。

本发明所采用的技术方案是按照以下步骤进行：

（1）将百子莲幼小花蕾采集后带回实验室，洗洁精清洗4min，用清水冲净，将清洗干净的花蕾每个培养瓶分装，用75%浓度乙醇溶液浸泡30s，0.1%浓度升汞水溶液中振荡灭菌10min，水冲洗，滤纸吸干花蕾表面水分；

（2）将经过步骤（1）处理的花蕾对半切割开接种至添加有6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸和奈乙酸的MS为诱导培养基中30d形成不定芽；

（3）将不定芽以每丛3-4个单芽的方式接种至添加有6-苄氨基腺嘌呤、奈乙酸和赤霉素的MS增殖培养基中，30d后不定芽增殖形成大量嫩绿的丛生芽；

（4）将平均叶长为2.0cm左右的丛生芽切割后成单芽接种至含有萘乙酸和吲哚丁酸的1/2MS的生根培养基中，30d后形成根；

（5）将生根的植株移栽至由泥炭和珍珠岩组成的基质中。

本发明的特点还在于步骤（1）中百子莲幼小花蕾采集的时间是6月份，花蕾在形成1周之内，所述步骤（2）中诱导培养基中添加6-苄氨基腺嘌呤2.5mg.L^-1、奈乙酸0.1mg.L^-1、吲哚丁酸0.3mg.L^-1，蔗糖3%。在步骤（3）中增殖培养基为MS且添加有6-苄氨基腺嘌呤2.5mg.L^-1、奈乙酸0.25mg.L^-1、赤霉素0.05mg.L^-1、蔗糖3%；或MS且添加6-苄氨基腺嘌呤3.5mg.L^-1、奈乙酸0.25mg.L^-1、赤霉素0.10mg.L^-1、蔗糖3%的两种培养基中交替培养，可获得6.02的增殖倍数和生长粗壮的不定芽丛。在步骤（4）中生根培养基为1/2MS且培养基中添加吲哚丁酸0.5mg.L^-1、奈乙酸0.5mg.L^-1，蔗糖1.5%。步骤（5）中移栽基质泥炭与珍珠岩的比例为3:1。

本发明的有益效果是百子莲的种苗产量高。

具体实施方式

本发明的具体实施方式如下步骤：

步骤1：试验材料和处理方法；试验材料：选取百子莲花蕾为外植体，在6月期间，将形成一星期之内的百子莲幼小花蕾连同花梗采收。材料处理方法：先对花蕾进行表面清洗，清洗液可选用洗洁精等，后用清水冲洗4～5次。将清洗干净的花蕾按照每个培养瓶20个进行分装，然后在超净工作台用75%浓度乙醇溶液浸泡30s取出，0.1%浓度升汞水溶液中进行振荡灭菌10min，无菌水冲洗5～6遍，消毒滤纸吸干花蕾表面水分，进行下一步。