[发明专利]一种百子莲高频再生体系建立的方法

权利要求书

1.一种百子莲高频再生体系建立的方法，其特征在于：按照以下步骤进行：

（1）将百子莲幼小花蕾采集后带回实验室，洗洁精清洗4min，用清水冲净，将清洗干净的花蕾每个培养瓶分装，用75%浓度乙醇溶液浸泡30s，0.1%浓度升汞水溶液中振荡灭菌10min，水冲洗，滤纸吸干花蕾表面水分；

（2）将经过步骤（1）处理的花蕾对半切割开接种至添加有6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸和奈乙酸的MS为诱导培养基中30d形成不定芽；

（3）将不定芽以每丛3-4个单芽的方式接种至添加有6-苄氨基腺嘌呤、奈乙酸和赤霉素的MS增殖培养基中，30d后不定芽增殖形成大量嫩绿的丛生芽；

（4）将平均叶长为2.0cm左右的丛生芽切割后成单芽接种至含有萘乙酸和吲哚丁酸的1/2MS的生根培养基中，30d后形成根；

（5）将生根的植株移栽至由泥炭和珍珠岩组成的基质中。

2.按照权利要求1所述一种百子莲高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述步骤（1）中百子莲幼小花蕾采集的时间是6月份，花蕾在形成1周之内，所述步骤（2）中诱导培养基中添加6-苄氨基腺嘌呤2.5mg.L^-1、奈乙酸0.1mg.L^-1、吲哚丁酸0.3mg.L^-1，蔗糖3%。

3.按照权利要求1所述一种百子莲高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述在步骤（3）中增殖培养基为MS且添加有6-苄氨基腺嘌呤2.5mg.L^-1、奈乙酸0.25mg.L^-1、赤霉素0.05mg.L^-1、蔗糖3%；或MS且添加6-苄氨基腺嘌呤3.5mg.L^-1、奈乙酸0.25mg.L^-1、赤霉素0.10mg.L^-1、蔗糖3%的两种培养基中交替培养，可获得6.02的增殖倍数和生长粗壮的不定芽丛。

4.按照权利要求1所述一种百子莲高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述在步骤（4）中生根培养基为1/2MS且培养基中添加吲哚丁酸0.5mg.L^-1、奈乙酸0.5mg.L^-1，蔗糖1.5%。

5.按照权利要求1所述一种百子莲高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述步骤（5）中移栽基质泥炭与珍珠岩的比例为3:1。