[发明专利]一种测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法

说明书

技术领域

本发明属于临床医学技术领域，尤其涉及一种测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法。

背景技术

细叶黄皮(Clausena anisum-olens(Blanco)Merr.)，芸香科植物，俗称鸡皮果，又名细叶黄皮，为柑桔亚科黄皮属多年生常绿大灌木或小乔木，主要分布于南亚热带地区，主产我国广西西南部、云南南部、广东新会及越南北部和菲律宾。细叶黄皮为珍稀佳果，果皮、果肉、果仁均可食用，含有多种氨基酸、维生素及矿物质。在药用方面，果实可助食消暑、消积去滞、祛痰化气、疏通肠胃；枝叶可人药，有引气、健胃、止痛、跌打刀伤、消风肿、去疳积等功能。

细叶黄皮果实含17种氨基酸、多种维生素以及丰富的铁、钙等营养元素，营养价值高。此外，细叶黄皮枝叶、果实、根茎还具有祛痰化气、消积消滞等药效，有很好的保健功效。

广西有丰富的细叶黄皮果资源，主要分布在龙州、大新、宁明、扶绥等县。广西西南部群众常将其作调配香料，加工成果皮干、果酱，用于肉类、糕点制作的增香调料。副产品开发种类有限，产品附加值低，为促进当地农民增收，加快少数民族地区脱贫的步伐，对细叶黄皮进行综合利用、提高资源利用率、深层次的开发研究迫在眉睫。

目前，有关细叶黄皮的化学成分研究已有报道，(汪云松，沈月毛，何红平.河口细叶黄皮化学成分研究[J].有机化学,2003,23(增刊)：144.)等从细叶黄皮中提取分离了5个化合物，分别为4-(3-methoxyphenyl-4-O--D-glucopyanoside)-2-butanone，3-(4-hydroxyphenyl)-2-propenoic acid，3-(3-methoxyphenyl-4-hydroxy)-2-propenoic acid，3-(3-methoxyphenyl-4-hydroxy)-2-propenoic acid，3-(3，4-dihydroxyphenyl)-2-propenoic methyl ester，3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid。Wang Yun-song[WangY S，Huang R，LI N Z al.Coumarins from Clausum-olens Merr[J].Biosci Biotechnol Biochem,2010,74(7)：100143-1-2.]等从细叶黄皮中提取到7个化合物，分别为anisumarin、isoscopoletin、umbelliferone、anisocoumarin H、capnolactone、aurapten及7-[(E)-7′-hydroxy-3′,7′-dimethylocta-2′,5-dienyloxy]-coumar。(苏秀芳.GC-MS法分析鸡皮果叶挥发油的化学成分[J].安徽农业科学，2008,36(25)：10956-10957.[5]苏秀芳，梁振益.GC-MS法分析山黄皮茎根挥发油的化学成分[J].时珍国医国药2010,21(6)：1540-1542.)等研究表明，细叶黄皮各个部分都含有丰富的挥发油，其主要成分为：芳香类、烯类及酸类。有关细叶黄皮的抑菌活性研究鲜见有报道。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法，旨在解决缺少有关细叶黄皮对抑菌活性方法的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法，该测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法包括：

采用纸片扩散法，抑菌测试细叶黄皮果实、叶的乙醇提取物及其石油醚部位、氯仿部位及乙酸乙酯部位对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、杀螟杆菌、大肠杆菌的抑制作用；通过倾注平板法测定细叶黄皮根乙醇提取物及其石油醚部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、杀螟杆菌、大肠杆菌的抑制作用；得出了细叶黄皮果实、叶、根乙醇提取物及其石油醚部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、杀螟杆菌及枯草杆菌均有抑制作用。

进一步，采用倾注平板法测试细叶黄皮提取物抑菌活性的方法包括以下步骤：

步骤一，细叶黄皮根提取物的提取，把细叶黄皮根自然晾干，粉碎，用30％的乙醇浸泡10天，减压蒸馏至浸膏状，得到乙醇提取物，一部分留作实验，一部分依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，得到各部位浸膏，置4℃冰箱保存备用；