[发明专利]一种添加钒酸钠的降糖鸡腿蘑发酵工艺

说明书

技术领域

本发明涉及生物发酵领域，具体的说本发明涉及一种添加钒酸钠的鸡腿蘑深层发酵工艺。本发明旨在以鸡腿蘑为出发菌种，进行一级种子的培养和添加钒酸钠液体摇瓶发酵培养。本发明的工艺由于在发酵培养基中加入了钒酸钠，在发酵过程中与鸡腿蘑发生生物转化，大大提高了发酵液的生物活性。对鸡腿蘑的产业开发具有重要的意义。

背景技术

鸡腿蘑(Coprinus comatus)，又称鸡腿菇、毛头鬼伞，是极具药用价值的珍稀食用菌之一。鸡腿蘑还含有20种氨基酸，其中包括8种人体必需的氨基酸。经常食用有助于消化、增强食欲、增强机体免疫力，降低血糖、血脂等。据阿斯顿大学报道，鸡腿蘑含有治疗糖尿病偶的有效成分，能明显降低血糖浓度，是糖尿病人食疗选择的理想菇种。

近些年国内对鸡腿蘑的研究主要集中于它的驯化栽培、营养成分分析等方面，对于鸡腿蘑的液体培养国内也有研究和报道。由于鸡腿蘑多糖的医疗功效，一些学者从培养基、培养条件和糖类等营养因子对鸡腿蘑保外多糖的影响进行了深入研究，而在鸡腿蘑液体深层发酵培养基中添加钒酸钠未见报道。

对于鸡腿蘑的降血糖功能，山东大学的王玉萍等进行了富铬鸡腿蘑菌丝体发酵液降血糖作用的研究，证明了其发酵液开发成预防和治疗糖尿病的保健品和(或)药品的可能性。钒酸钠有类胰岛素的作用，许多研究证明：钒能降低血糖，但其有效浓度为0.8mg/mL，毒副作用很大。为此，很多研究者在其溶液中加入一定量的生理盐水，以减轻毒副作用，但效果不理想，离临床应用尚有一定的距离。

目前，鸡腿蘑主要以子实体的形式在市场上销售，而有关鸡腿蘑的保健品也只局限于其子实体粉末。而目前也尚无在鸡腿蘑液体深层发酵培养基中添加钒酸钠的论文和相关专利报道等。

本发明人经过深入的进一步研究提供了一种添加钒酸钠的鸡腿蘑液体深层发酵工艺，该工艺既提高了降糖效果，又降低了钒酸钠用量大造成的毒副作用。该发酵液在药物和/或保健品的制备方面具有广阔的应用前景，特别适用于制备预防和/或治疗糖尿病的药物和/或保健品。

发明内容

本发明的目的是提供了一种鸡腿蘑液体深层发酵的工艺，其特征是在所述的发酵工艺中添加了能降血糖的钒酸钠。

本发明的液体深层发酵工艺包括以鸡腿蘑为出发菌株，进行一级种子的培养和添加钒酸钠的液体摇瓶发酵培养，其特征是在于所述的液体摇瓶深层发酵培养过程中添加了钒酸钠。

具体地，在本发明添加钒酸钠的鸡腿蘑深层发酵工艺中，其中所述一级种子培养的培养基组成为(单位为克/100毫升)：土豆15-25，麸皮1-4，葡萄糖1-4，KH₂PO₄0.1-0.3，MgSO₄0.2-0.5，加水至适当体积，接入鸡腿蘑斜面菌株；摇瓶培养的培养条件是：培养温度22-28℃，转速110-150转/分钟，培养时间4-6天。

本发明添加钒酸钠的鸡腿蘑液体深层发酵工艺中，其中所述添加钒酸钠的液体摇瓶深层发酵培养的培养基组成为(单位为克/100毫升)：土豆15-25，麸皮1-4，葡萄糖1-4，KH₂PO₄0.1-0.3，MgSO₄0.2-0.5，钒酸钠0-1，加水至适当体积；添加钒酸钠液体摇瓶发酵培养的培养条件是：接种权利要求2中所述一级种子，接种量为5-10％(体积百分比)，培养温度22-28℃，转速110-150转/分钟，培养时间4-6天。

更具体地，本发明的发酵工艺通过以下步骤来实现：

(1)取出鸡腿蘑菌种的斜面菌种接入新配制的斜面培养基中，培养基温度22-28度，培养时间5-8天；

(2)将步骤1中的斜面菌种接入装有上述摇瓶培养基的三角瓶中，22-28度培养，转速110-150转每分钟，培养时间4-6天，然后进行摇瓶扩大培养；

(3)将步骤2中的摇瓶菌种按5-10％(体积百分比)的接种量转接入装有上述摇瓶扩大培养基的三角瓶中进行扩大培养，培养温度22-28℃，转速110-150转/分钟，培养时间4-6天；

其中所述的斜面培养基配方为土豆培养基，该培养基在多种教科书和论文中均有表述，这里不再详细列出其组成；所述的一级种子培养基和添加钒酸钠的液体摇瓶发酵培养基如上文所述。

本发明所使用的鸡腿蘑菌种可选用任意一种鸡腿蘑菌种，例如可购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)CGMCC No.5.156，CGMCC No.5.252和CGMCC No.5.258。