[发明专利]一种T7核酸内切酶I的制备方法在审

专利信息
申请号: 201410141111.4 申请日: 2014-04-09
公开(公告)号: CN104974993A 公开(公告)日: 2015-10-14
发明(设计)人: 李华平;张金阔;钱柳青;范名俊;朱苗苗 申请(专利权)人: 广州复能基因有限公司
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12N15/70
代理公司: 广州三环专利代理有限公司 44202 代理人: 刘宇峰
地址: 510663 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 t7 核酸 内切酶 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(a)T7核酸内切酶的表达载体的构建;

(b)将不含有终止密码子的编码序列插入到步骤a所获得的蛋白表达载体中;以及

(c)采用与标签相适应的纯化方法,获得目标蛋白质即T7核酸内切酶。

2.根据权利要求1所述的T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于,所述表达载体包括:

用于插入目的蛋白即T7核酸内切酶的编码序列的识别和切割位点;

在所述识别和切割位点的上游具有如SEQ ID NO:1所示的gIIIs信号肽编码序列,其前面是起始密码子;

在所述识别和切割位点的下游具有His6标签,其后面是终止密码子。

3.根据权利要求2所述的T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于:所述的识别和切割位点为BsaI识别及切割位点。

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