[发明专利]一种T7核酸内切酶I的制备方法在审
| 申请号: | 201410141111.4 | 申请日: | 2014-04-09 |
| 公开(公告)号: | CN104974993A | 公开(公告)日: | 2015-10-14 |
| 发明(设计)人: | 李华平;张金阔;钱柳青;范名俊;朱苗苗 | 申请(专利权)人: | 广州复能基因有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/70 |
| 代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 刘宇峰 |
| 地址: | 510663 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 t7 核酸 内切酶 制备 方法 | ||
1.一种T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(a)T7核酸内切酶的表达载体的构建;
(b)将不含有终止密码子的编码序列插入到步骤a所获得的蛋白表达载体中;以及
(c)采用与标签相适应的纯化方法,获得目标蛋白质即T7核酸内切酶。
2.根据权利要求1所述的T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于,所述表达载体包括:
用于插入目的蛋白即T7核酸内切酶的编码序列的识别和切割位点;
在所述识别和切割位点的上游具有如SEQ ID NO:1所示的gIIIs信号肽编码序列,其前面是起始密码子;
在所述识别和切割位点的下游具有His6标签,其后面是终止密码子。
3.根据权利要求2所述的T7核酸内切酶的制备方法,其特征在于:所述的识别和切割位点为BsaI识别及切割位点。
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