[发明专利]一种与小型猪2型糖尿病有关的SNP标记、其检测方法和用途

权利要求书

1.一种与小型猪2型糖尿病易感性相关的SNP标记，其特征在于，所述SNP标记是在小型猪Leptin基因的1号外显子325bp处的G/A多态，具有该SNP标记的Leptin基因的1号外显子核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.检测权利要求1所述的SNP标记的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取小型猪的基因组DNA；

（2）用已提取的小型猪基因组DNA为模板，使用核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQIDNO:3所示的引物来进行PCR扩增；

（3）将PCR扩增产物测序，分析测序结果，判读在1号外显子325bp处的G/A多态。

3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，将PCR产物先经琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的片段后再进行测序。

4.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（2）所述的PCR扩增反应体系为：DNA模板3μL、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物各2μL、PCR Mix试剂25μL、双蒸水18μL；其中，所述DNA模板浓度为30ng/μL，所述引物的浓度为25μmol/L，所述PCRMix试剂为北京康为世纪生物科技有限公司的CW0716型号试剂。

5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR扩增的反应程序为：预变性94℃5min；变性98℃10s，退火61℃30s，延伸72℃30～60s，35个循环；延伸72℃7～10min。

6.检测权利要求1所述的SNP标记所用的引物，其特征在于：所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

7.权利要求1所述的SNP标记在筛选对2型糖尿病易感或抵抗的小型猪品系中的用途。